秸秆降解菌及小麦根腐病生防菌的筛选

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秸秆还田已成了我国主要秸秆处理方式,我省是农业大省,秸秆还田也得到普及,秸秆还田虽然解决了秸秆堆积、焚烧等问题,秸秆还田虽然有益,但是也存在很多问题,目前存在的负面影响主要体现在秸秆腐熟太慢,导致土壤疏松,影响植物种子萌发、造成苗黄、苗弱,影响根系发育,并且长期未腐化会造成病原菌的大量繁殖,导致土传病害的流行,给粮食安全造成了威胁,对农业生产和农民增收影响极大。目前秸秆降解菌剂的利用在农业生产上也很少,土传病害的防治主要是采用药剂防治和农业防治,但其防治的效果并不理想。之前也有报道关于秸秆降解菌的筛选和土传病害生防菌的利用,但是关于小麦根腐病生防菌的报道目前还较少。本论文针对以上问题,对秸秆高效降解菌及对小麦根腐病菌有生防效果的菌株进行了筛选研究。为利用有益微生物加快秸秆腐熟及防治土传病害,开发生物制剂,并推广应用奠定基础。具体试验结果如下。1、秸秆降解菌的筛选和鉴定2015年从山东、河南等地采集土壤及枯枝样本分离纯化菌株,活化本实验室保存的292份菌株,利用室内特定培养基初筛、纤维素木质素酶活性的测定、秸秆降解率的测定和室内盆栽试验测定方法,初步筛选出具有降解纤维素能力的真菌菌株2株分别是X151、X125其秸秆降解率分别为25.00%和26.80%,具有降解木质素能力的真菌菌株1株编号为XSBN-071-1,秸秆降解率为25.00%,其中降解纤维素菌株和降解木质素菌株复合菌株的秸秆降解率最高的是X125-XSBN-071-1的结合,其降解率为37.50%,比最高单菌株秸秆降解率高出了10.70%。经鉴定纤维素降解菌X125是疣凸假蕉孢壳菌(Diatrypella verruciformis),木质素降解菌XSBN-071-1鉴定为枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporiodies)。2、小麦根腐病原菌生防菌的筛选和鉴定从各地采集土样分离出后选菌株56株,整理活化实验室保存的候选菌206株,其中包括真菌和细菌。采用特定培养基室内平板初筛、平板复筛、盆栽试验筛选出对小麦根腐病原菌麦根腐蠕孢菌和假禾谷镰刀菌具有抑菌效果的生防菌,其中对假禾谷镰刀菌有抑菌效果的生防菌有真菌和细菌,共筛选出来2株,真菌是XC-1木,细菌是XJ-17,对麦根腐蠕孢菌防病效果较好的菌株真菌是XC-1木、木-2,细菌是XJ-15。本实验针对最终效果好的菌株提取基因组DNA,然后用真菌通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增,生防细菌采用27F和1492R进行PCR扩增,并进行形态特征观察、生理生化实验的测定对筛选出的菌株进行鉴定。经鉴定,生防真菌XC-1木为拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis),木-2为深绿木霉菌(Trichoderma atroviride),生防细菌XJ-15,XJ-17为同一个种甲基型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。我们检测发现两种生防木霉菌与甲基营养型芽孢杆菌有较强的拮抗反应,不能同时混用。
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