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wdr72是本文课题组筛选的蛋壳强度相关的一个新基因，具体生化功能及生物学特性均未见报道。本文提取蛋鸡子宫组织，克隆wdr72的全长编码基因；用原核载体对wdr72的C端（3’端）序列进行诱导表达并纯化获得重组蛋白、制得其多抗；此外，本文还利用qRT-PCR研究wdr72基因在蛋鸡各个组织器官中，蛋壳形成过程中鸡产道中的表达规律。1）克隆wdr72全长编码基因：提取蛋鸡子宫组织总RNA并反转录。参照GenBank中原鸡（G. gallus）wdr72基因序列，设计3对引物，（分别对应1-970bp、877-2172bp、2111-2784bp）。从鸡子宫cDNA中PCR克隆上述3个基因片段，测序正确后，连接到真核表达质粒pEGFP-N1中，得到wdr72全长基因2）原核表达wdr72的C端（3’端）序列：将wdr72的C端（3’端）序列（1984-2784bp）构建到原核表达质粒pET28b中，获得wdr72的C端编码基因的原核表达重组子。经过优化，在37℃用0.4mM IPTG诱导得到了包涵体形式表达的产物。3）纯化WDR72的C端（3’端）肽链：用8M尿素溶解后，将重组蛋白过镍柱，然后用500mM咪唑梯度洗脱获得大量较高纯度的WDR72-C重组蛋白，并用其制作多克隆抗体。4）采集蛋鸡的肝、心、脾、肺、胃、肠、肾、脑、胸肌以及输卵管、白峡、子宫等产道组织。另外通过观测蛋鸡的蛋壳品质及其产蛋规律，分别在蛋清形成阶段、壳膜形成阶段、初始矿化阶段、快速矿化阶段、快速矿化后期采集产道组织。提取RNA后并反转录后，利用荧光定量PCR法比较分析wdr72基因的表达特点，结果表明该基因主要表达在产道组织中，其中又以子宫组织最多，另外wdr72在壳膜形成阶段及快速矿化阶段有着活跃的表达。总之，本文克隆并构建了wdr72全长编码基因的原核表达重组质粒；表达并纯化了WDR72-C端肽链序列，并制备了WDR72多抗；揭示了wdr72在蛋鸡体内的表达规律及其与蛋壳形成的关联性。