【摘 要】
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目的:构建c-myc反义RNA表达载体和新型肝癌靶向性四元复合物基因定向转移系统,探讨c-myc反义RNA对人肝癌细胞内靶基因表达、细胞凋亡诱导及细胞周期等生物学活性的作用;并研
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目的:构建c-myc反义RNA表达载体和新型肝癌靶向性四元复合物基因定向转移系统,探讨c-myc反义RNA对人肝癌细胞内靶基因表达、细胞凋亡诱导及细胞周期等生物学活性的作用;并研究其在荷瘤裸鼠模型体内对肝癌细胞的抑制作用.结论:该研究成功构建了c-myc反义RNA表达载体(pcDNA3.1-as-c-myc);建立了一种新的以肿瘤细胞特异高表达的EGFR介导的反义RNA肝癌靶向性基因转移系统,实现了在肿瘤组织中的特异性转移.瞬时转染和稳定转染试验证明c-myc反义RNA能够抑制人肝癌细胞系HepG2.2.15和HepG2内c-myc蛋白的表达,阻遏细胞的生长增殖,使细胞大部分处于G0/G1期;体内试验证明c-myc反义RNA可以抑制肿瘤细胞的生长.首次证明c-myc反义RNA和IFN-α联合用药,可以取得良好的抑制效果.意义:1.该研究首次构建了c-myc反义RNA肝癌靶向性基因转移表达系统,该系统从基因转移、靶基因选择两方面同时实现了靶向性.体内外实验证明,c-myc反义RNA可以有效抑制c-myc的表达,为实现靶向性肝癌的基因治疗提供了较为理想的选择.2.利用新型高效的基因导入系统,建立了稳定转染的细胞系,为进一步研究c-myc反义表达载体对细胞内靶基因表达的抑制,细胞恶性表型的逆转情况及其作用机理奠定了理论基础.
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