基于毛竹半纤维素的银纳米粒子的制备及其抗菌活性评估

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由于长期大量抗生素的滥用,越来越多的细菌产生耐药现象,因此抗菌范围广、抗菌效果高的抗菌剂的开发和应用已成为现代食品、医药、纺织等行业的热点。与传统抗生素等抗菌剂相比,银纳米粒子具有杀菌效果显著和广谱抗菌性等优点,且菌不会对银纳米粒子产生耐药性,因此银纳米粒子在抗菌剂方面具有巨大的发展潜力。与银纳米粒子的传统制备手段不同,生物合成法制备的银纳米粒子生物相容性好、安全系数高、经济高效、合成工艺环境友好,在合成银纳米粒子领域受到广泛青睐。本研究以低分子量(M=3748 g/mol)毛竹半纤维素多糖作为稳定剂,葡萄糖作为还原剂绿色制备银纳米粒子,探讨银纳米粒子的储存稳定性和抗菌活性。本研究结果将为基于毛竹半纤维素多糖的银纳米粒子作为抗菌剂在食品包装、医药等领域的深层次应用提供理论依据。毛竹半纤维素多糖表现出良好的稳定剂作用,可合成平均粒径小于10 nm的银纳米粒子,能将Ag+缓慢还原为Ag0。半纤维素用量越高,对银纳米粒子长大的抑制作用越强。Zeta电位分析表明全部银纳米粒子表面带负电荷。增大半纤维素的浓度、AgNO3浓度和温度均能加速银纳米粒子产生。制备得到的银纳米粒子中生成大量由少于7个银原子组成的银纳米晶,但在4℃储存过程中这种银纳米晶数量减少。改变制备条件得到的银纳米粒子在4℃储存过程中,随着储存时间延长,其粒径在增大,使得银纳米粒子的表面等离子体共振吸收峰强度随储存时间延长而增大,且存在良好的线性正相关性。增大半纤维素用量、降低制备温度及延长反应时间均有利于增强银纳米粒子在4℃条件下的储存稳定性。较低初始AgNO3浓度所制备的银纳米粒子在25℃时的储存稳定性较差,而较高初始AgNO3浓度所制备的银纳米粒子在25℃时的储存稳定性较高。总体上,以低分子量的半纤维素作为稳定剂合成的银纳米粒子具有较好的储存稳定性。不同前驱物AgNO3浓度、稳定剂半纤维素浓度和还原剂葡萄糖浓度制备的银纳米粒子对革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌和革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌菌均表现出良好的抑菌活性。银纳米粒子的抑菌活性强弱与银纳米粒子的使用量和抑菌时间有关,银纳米粒子用量越大,抑菌时间越长,抑菌作用越显著。银纳米粒子抑菌活性的强弱与银纳米粒子制备时的半纤维素浓度关系不大。银纳米粒子能诱导细菌细胞膜破裂,银纳米粒子溶液处理细菌12 h后,所有细菌细胞膜均遭破损,菌悬液中无活菌存在。银纳米粒子抑菌过程当中生成了活性氧物种(ROS),产生的ROS量与银纳米粒子的添加量有关,提高银纳米粒子的用量有利于ROS的产生。引入ROS清除剂组氨酸后,枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌均能恢复正常生长,表明银纳米粒子抑菌过程中ROS起至关重要的作用。革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌比革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌对基于毛竹半纤维素的银纳米粒子更敏感。
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