【摘 要】
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目的:研究美洲大蠊醇水混合提取物(康复新液)(Alcohol-water extract of Periplaneta Americana,APA)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)致大鼠睾丸氧化损伤的保护作用及其可能机制,为临床中使用环磷酰胺化疗的男性肿瘤患者的生殖系统损伤的预防和治疗提供理论依据及新的治疗思路。方法:将24只8周龄性成熟SPF级成年雄性(Sprague Daw
【基金项目】
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云南省教育厅科学研究基金《美洲大蠊提取物对环磷酰胺损伤大鼠生精功能的影响》(项目编号:2021Y435);
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目的:研究美洲大蠊醇水混合提取物(康复新液)(Alcohol-water extract of Periplaneta Americana,APA)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)致大鼠睾丸氧化损伤的保护作用及其可能机制,为临床中使用环磷酰胺化疗的男性肿瘤患者的生殖系统损伤的预防和治疗提供理论依据及新的治疗思路。方法:将24只8周龄性成熟SPF级成年雄性(Sprague Dawley,SD)大鼠随机分为3组,分别为:正常对照组(Control group,CG)、模型组(Model group,MG)、治疗组(Treatment group,TG),适应性喂养5d,治疗组按(0.3ml/10g.d)经口灌胃APA预给药5d以后,除CG外,MG和TG均腹腔注射CP75mg/kg.d,连续1周,CG腹腔注射等体积生理盐水(normal saline,NS)(注:生理盐水体积CP75mg/kg.d计算),造模结束后,CG和MG继续经口灌胃NS连续25d,TG继续按0.3ml/10g.d灌胃APA,连续25d,药物处理完毕禁食24h后处死所有实验动物。统计大鼠体重,睾丸、附睾重量并计算睾丸指数、附睾指数,ELISA检测大鼠血清中促卵泡刺激素(FSH),促黄体生成素(LH)等激素水平,检测睾丸匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、睾酮(T)含量,睾丸组织切片HE染色观察生精上皮损伤情况。结果:美洲大蠊醇水混合提取物(APA)能够减缓CP所致大鼠体重、睾丸及附睾指数的下降程度,同时能使CP作用后大鼠的一般精神状态、皮毛顺滑程度、饮食,饮水情况有所改善。HE染色观察发现在使用APA药物治疗后TG中生精上皮虽有较严重的损伤,但在电镜下仍可观察到,说明APA能减轻CP对大鼠睾丸内曲细精管的生精上皮的损伤,起到一定保护作用,维持其生精功能;MG中HE染色几乎未见完整的生精上皮,可进一步验证了 MG和TG的造模成功。HE染色观察到CG的生精上皮完整性良好,曲细精管管腔饱满,内可见成熟精子。对于大鼠血清FSH及LH激素水平检测中发现:MG、TG中各组FSH、LH含量与CG相比均有明显升高(P<0.05),MG升高程度更为明显。大鼠睾丸组织匀浆SOD、MDA、T含量检测中发现:TG和MG中的SOD含量与CG相比较均明显降低(P<0.05),MDA水平明显升高,表明TG和MG的大鼠睾丸均受到CP不同程度的氧化损伤,以MG氧化损伤程度更为显著,APA对TG组有一定的保护作用;MG和TG中T水平均较CG组明显减低(P<0.05),以MG中T水平减低更为显著。综上实验结果表明CP可能是通过降低大鼠睾丸氧化-抗氧化防御机制来实现睾丸氧化损伤,睾丸组织内氧自由基大量蓄积,以使机体发生脂质过氧化,损伤生精上皮,导致生精功能障碍,导致T含量减低,反馈性导致FSH、LH明显升高。结论:1、美洲大蠊提取物(康复新液)对CP所致的睾丸氧化损伤引起的大鼠生精功能障碍具有明确的保护作用,其机制可能与APA抗氧化作用有关,其主要通过降低血清中FSH、LH等激素水平,降低睾丸组织中MDA,提高SOD水平,恢复T水平得以实现;2、环磷酰胺作为化疗药物的剂量水平对雄性大鼠造成的生殖系统损伤是明确的,通过APA抗氧化剂治疗后生精功能得以一定程度恢复;3、抗肿瘤治疗前规律使用抗氧化药物(APA)辅助治疗,可能通过提高机体自身的抗氧化能力,一定程度上避免化疗药物对机体各个系统的氧化损伤,该实验说明APA对生殖系统的保护效果是明确的。
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