宫颈上皮内瘤变中HPV感染与病理学及细胞学改变的相关性的探讨

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实验目的宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是宫颈癌的癌前病变,对CIN的早期诊断和有效的治疗,是预防宫颈癌发生的重要途径。CIN的检测和确定包括临床检查、细胞学、阴道镜检、活体组织检查和病理学诊断,以及必要实验室PCRDNA检测分析等,随着CIN诊断日趋成熟,细胞学联合阴道镜下活检仍是CIN及早期宫颈癌可靠的早期诊断方法。国内外大量研究表明,高危型HPV感染是CIN及宫颈癌发病的直接原因,荷兰病理学Dr.CJLM Meijer在阿姆斯特丹及沃卓伦的研究中证实,HPV高危型检测诊断CIN的阴性预测值>99%,HPV DNA检测与细胞学检查联合进行宫颈上皮内瘤变的筛查,其筛查效率高于单独使用细胞学检查,研究结果提示联合两种方法的检测率几乎高达100%。实验方法1、研究对象本实验选取辽宁省肿瘤医院妇科门诊就诊患者为研究对象,以阴道镜下活检病理为诊断标准,样本量为90例,CINⅠ30例,CINⅡ30例,CINⅢ30例。2、用杂交捕获的方法检测HPV DNA采用Digene公司提供的杂交捕获Ⅱ代(HC-Ⅱ)HPV DNA检测系统进行检测,试剂采用Digene公司提供的高危型HPV DNA试剂盒,检测探针包括13种HPV亚型,即16、18、31、33、35、39、45、51、56、58、59、68型。主要步骤包括:(1)裂解;(2)杂交;(3)捕获;(4)反应;(5)冲洗;(6)收集信号;(7)结果判定:HPV DNA含量超过1pg/ml即RLU/CO比值大于1为阳性。3、薄层液基细胞学检测方法专用采样器采集宫颈脱落细胞,将标本保存盛有细胞保存液的小瓶中,标本经系统处理后制成薄层涂片,95%酒精固定,巴氏染色,请有经验的病理医生阅片,依据TBS细胞分类法做出判断,结果判定:结果是ASCUS以上者为阳性。4、阴道镜下病理检查对阴道镜下有白色病变、镶嵌、腺体开口、异型血管等可疑病变部位进行定点活检,对镜下正常者行常规4点活检,活检组织送病理。5、统计学方法实验数据中各检出率的差异分析采用x~2检验,显著性差异界限为α=0.05,实验数据采用SPSS12统计软件进行统计学分析。实验结果1.高危型HPV感染组中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ的检出率分别为51.6%、58.1%、93.5%。说明高危型HPV感染与CIN的发生发展密切相关,病变程度愈高HPV感染率愈高。2.高危型HPV感染组中,细胞学阳性率分别为ASCUS58.3%、LSIL72.4%、HSIL95%,与HPV非感染组中阳性率比较有统计学意义。结论1.高危型HPV感染率伴随宫颈病变程度的加重而升高,其差异有显著性。2.随着细胞学级别的升高,高危型HPV阳性率越高。3.HPV DNA检测的高敏感性与液基细胞学结合能有效地提高宫颈上皮内瘤变的检出率。
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