ZwittermicinA是一种由苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)产生的新型抗生素，可抑制多种微生物，而且与Bt杀虫晶体蛋白混用能显著提高Bt的杀虫活性。本实验室的前期研究获得了一大批高产ZwittermicinA的菌株，并对其中的G03菌株进行了深入的研究：构建了G03的基因组BAC文库，从中筛选出含ZwittermicinA生物合成基因簇的阳性克隆。本文对该阳性克隆进行了全长测序，分析获得完整的ZwittermicinA合成基因簇，该基因簇全长56.194kb(比国外已发表的15.879kb序列向两侧扩展40.315kb)包含22个开放阅读框，其中9个完整的开放阅读框(tzwD、tzwE、tzwF、tzwG、tzwH、tzwI、tzwJ、tzwK、tzwL)和一个不完整的开放阅读框(tzwM)为国外已发表的。其余的12个为新发现的开放阅读框，分别为：tzwA、tzwB、tzwC、tzwN、tzwO、tzwP、tzwQ、tzwR、tzwS、tzwT、tzwU和tzwV。其中tzwA、tzwB、tzwC位于已发表序列的上游，tzwN、tzwO、tzwP、tzwQ、tzwR、tzwS、tzwT、tzwU和tzwV位于已发表序列的下游。 采用同源双交换方法对新基因中的tzwC、tzwM、tzwO、tzwT和tzwU进行了基因阻断，分别获得了出发菌株G03的tzwC的缺失阻断突变株、tzwM的插入阻断突变株、tzwO的缺失阻断突变株、tzwT的缺失阻断突变株和tzwU的缺失阻断突变株。通过基因回补获得了各个阻断突变株的恢复株。抑菌活性测定结果表明5个阻断突变株都失去了出发菌株原有的抑菌活性，基因回补后又恢复了抑菌活性。质谱测定结果表明，出发菌株G03产生分子量为396Da的ZwittermicinA，阻断突变株不再产生该物质，基因回补后的恢复株中又重新产生ZwittermicinA。以上结果充分表明tzwC、tzwM、tzwO、tzwT和tzwU都是ZwittermicinA生物合成所必需的。