多功能纳米粒子在核磁共振成像方面的应用及磁分离对肿瘤细胞检测的研究

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从二十世纪六十年代以来,纳米科技在短短几十年内经历了飞速的发展。纳米科技是指纳米尺度(1~100nm)上研究物质的特性,以及利用这些特性的多学科交叉的科学和技术,它使人类认识和改造物质世界的手段和能力延伸到原子和分子级别。而纳米材料的发展是从二十世纪八十年代开始,把功能化的纳米材料和生命科学相结合产生的纳米生物技术是人们竞相研究的热点课题,其中以纳米材料与核磁共振成像技术之间的研究最为热门。磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)技术是重要的分子成像技术之一,自1973年问世以来,由于具有功能强、无损伤和为软组织提供完美的解剖图像细节等特性而备受生物医学者的青睐,现成为临床诊断中必不可少的重要工具之一。近年来随着纳米材料科学的飞速发展,各类新型磁共振造影剂(contrast agent)不断出现,为磁共振成像技术的发展增添了新的力量,其中应用最广、最具有代表性的就是超顺磁氧化铁微粒这种纳米颗粒,它以其小尺寸,超顺磁,均一,稳定和生物相容性等特点,成为研究者在医学核磁共振成像方面首选的一种优良的造影剂。另外,纳米材料由于具有良好的磁学性质,在细胞磁分离方面凸显出很好的优势,在外加磁场作用下,修饰后的功能化的磁性纳米粒子可以快速有效地靶向富集血细胞中含量极少的癌细胞,从而达到方便检测的目的。本文主要研究了多功能磁性纳米粒子作为靶向造影剂在肿瘤细胞磁共振成像的应用以及在血液中对肿瘤细胞的富集和检测的条件方面的探索。(1)采用化学共沉淀法制备了葡聚糖包裹的γ-Fe2O3磁性纳米粒子,用XRD、IR、TEM、VSM对粒子进行表征。通过化学键的耦合使粒子表面连接生物分子的抗体,用于肺癌细胞的标记,普鲁士蓝染色法和MRI中T2下降值分别测定抗体连接效率;MTT法测试低浓度下多功能的免疫磁粒子进入细胞后48小时细胞存活率,结论是低浓度下粒子对细胞毒性影响不大,再用一系列低浓度免疫粒子进入细胞进行MRI测试,结果显示低浓度下的γ-Fe2O3磁性纳米粒子可以很好的作为肺癌细胞靶向造影剂的阴性增强剂。(2)采用反相微乳液法制备了二氧化硅包裹的磁性纳米粒子,并通过化学修饰在磁性纳米粒子的表面连接了具有生物活性的氨基官能团,通过交联剂的作用使它和生物分子的抗体连接靶向于肺癌细胞,通过磁分离建立快速有效分离检测血液中微量癌细胞的方法,检测限能达到50个癌细胞中收集25个左右的细胞,富集效率在50﹪左右,这对肺癌的早期诊断提供了一种快速、灵敏的检测方法。
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