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目的:乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着女性的身心健康。乳腺癌易感基因BRCA(Breast Cancer Susceptibility Gene)是抑癌基因,参与DNA损伤的修复,维护基因组的完整;同时它们也是乳腺癌遗传易感基因,与家族性乳腺癌密切相关。本实验旨在探讨家族性与散发性乳腺癌患者BRCA1/2基因的突变位点及携带情况,并了解家族性乳腺癌与散发性乳腺癌患者在BRCA1/2基因突变、临床特点及病理特征等方面的差异。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products, PCR-SSCP)和基因测序技术对18例家族性乳腺癌患者、50例>35岁的散发性乳腺癌患者、23例乳腺良性疾病患者及20例正常人共111例血样标本的基因组DNA进行BRCA1/2基因突变的检测,并结合患者的临床资料、病理类型、临床分期、组织学分级、腋淋巴结转移情况、雌孕激素受体(Estrogen Receptor, ER; Progestogen Receptor, PR)状况以及血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)等因素进行相关分析。统计分析运用SPSS 12.0统计软件包中的χ2检验和Fisher’s确切概率法。以α=0.05为检验水准。结果:1 2005年6月至2006年5月在河北医科大学第四医院诊治的乳腺癌患者共有681例,其中家族性乳腺癌18例,占2.64%,低于国外水平(9.2%),亦低于目前国内报道(4.4%和5.52%)。2本实验在68例乳腺癌患者中共发现5例突变(162ATT>TTT;4142GTT>GTG;4196CAA>CAT;4196delA,4142GTT>GTG;5379GAA>AAA),均发生在BRCA1,占所有测序样本的7.35%(5/68)。所有突变位点均为首次发现,未发现文献报道的西方国家的突变热点,亦未发现中国人群中的“始祖突变”。3家族性乳腺癌患者中共发现突变3例,占16.7%(3/18);散发性乳腺癌(>35岁)患者中发现突变2例,占4.0 %(2/50)。家族性乳腺癌患者的BRCA1基因突变率明显高于散发性乳腺癌患者,但二者间未达到统计学差异(p=0.111);中国家族性乳腺癌及散发性乳腺癌BRCA1基因突变的发生率均低于西方国家;河北地区家族性乳腺癌的BRCA1基因突变率与国内报道相似,而散发性乳腺癌的BRCA1基因突变率低于国内报道。4本实验还新发现1个核苷酸多态性位点,该点位于BRCA1第20外显子下游第35个碱基处G>A(IVS20+35G>A),致使该位点一个精氨酸被一个组氨酸取代。该位点未在相关文献或BIC网站(Breast Cancer Information Core) (http://www.nhgri.nih.gov/Intramural- research/Labtransfer/Bic/)上查到,它们有可能是中国河北人群特有的多态性位点,值得今后进一步研究验证。5本实验在正常对照组中发现一例BRCA2基因突变(TTTCAGA—TGTCAA(6291insG,6294delG)),其将来是否发病有待于进一步观察。6本研究中BRCA1基因突变的乳腺癌与对照病例相比,髓样癌比例(40%)明显高于对照组(1.6%);组织学分级III级比例(60.0%)明显高于对照组(26.5%);ER、PR阴性率(60.0%, 60.0%)明显高于对照组(34.5%, 24.1%);CerbB2蛋白表达阴性率(60.0%)高于对照组(12.1%);VEGF蛋白表达阴性率(60.0%)高于于对照组(19.0%)。因病例数有限,仅做描述性分析,而未做统计学分析,所以仍需进一步积攒病例进行统计学分析后才能证实。7家族性乳腺癌的组织学分级III级比例(42.9%)明显高于散发性乳腺癌(19.1%),且两组间有统计学差异(p=0.040);家族性乳腺癌和散发性乳腺癌患者在年龄分布(χ2=0.505, p=0.918)、绝经状况(χ2=0.776, p=0.378)、肿瘤大小(χ2=0.081, p=0.960)、病理类型分布(χ2=0.626, p=0.731)、腋淋巴结转移率(χ2=0.169, p=0.681)、临床分期(χ2=0.374, p=0.830)等方面未见统计学差异;家族性乳腺癌患者ER阳性率(50.0%)低于散发性乳腺癌(69.4%),PR阳性率(64.3%)低于散发性乳腺癌(68.1%),VEGF蛋白表达阳性率(42.9%)明显高于散发性乳腺癌(25.8%),但两组在ER阳性率(p=0.145)、PR阳性率(p=0.775)、CerbB2蛋白表达阳性率(χ2=0.001, p=0.981)及VEGF蛋白表达阳性率(p=0.213)方面均无统计学差异。结论:1中国河北地区家族性乳腺癌的发生率低于国外和国内其它地区。2本实验在乳腺癌样本中共发现5例突变,均发生在BRCA1,所有突变位点均为首次发现,未发现文献报道的西方国家的突变热点,亦未发现中国人群中的“始祖突变”;3家族性乳腺癌患者的BRCA1基因突变率明显高于散发性乳腺癌;且中国家族性乳腺癌患者及散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变率均低于西方国家;河北地区家族性乳腺癌的BRCA1基因突变率与国内报道相似,但散发性乳腺癌的BRCA1基因突变率低于国内报道。4本实验还发现1个核苷酸多态性位点,该点位于BRCA1的第20外显子下游第35个碱基处G>A(IVS20+35G>A),该位点可能是河北地区人群中一个常见的多态性位点。5本研究所发现的乳腺癌相关性突变集中在BRCA1,BRCA1基因突变的乳腺癌与对照组病例相比,具有髓样癌比例高,肿瘤组织学分级III级比例高,ER、PR、CerbB2和VEGF阴性率增高的趋势,提示中国妇女BRCA1突变相关性乳腺癌有可能具有与西方人群相似的病理和免疫组化特点;BRCA2突变相关性乳腺癌的临床病理特点有待进一步研究。6家族性乳腺癌与散发性乳腺癌相比,家族性乳腺癌组织学分级III级比例明显高于散发性乳腺癌,两组间有统计学差异;但两组在年龄、绝经状态、肿瘤大小、病理类型、腋淋巴结转移、临床分期、受体情况、CerbB2及VEGF蛋白表达等方面均未见统计学差异,提示:乳腺癌家族史并不是影响乳腺癌预后的一个独立因素。