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近年来,随着生物纳米技术在医药领域的发展,纳米载药体系在降低抗肿瘤药物的毒副作用、实现药物的缓控释以及主动靶向等方面发挥着越来越重要的作用,成为人们研究的热点之一。本文设计、合成了两种不同类型的纳米递药系统,并对其体外抗肿瘤活性进行了研究。一、多功能型聚合物-药物轭合物纳米递药系统目的:通过遇酸不稳定的氨基甲酸酯键将阿霉素(DOX)与含有半乳糖的聚合物(mPEG42-b-PMAGP20)共轭,合成一种集pH敏感与肝癌靶向于一体的多功能型聚合物-药物轭合物(mPEG42-b-PMAGP20-co-DOX)纳米递药系统。方法:采用傅里叶红外光谱(FT-IR)和核磁共振氢谱(1H NMR)对其结构进行了表征;通过荧光光谱、纳米粒度仪(DLS)、透射电子显微镜(TEM)等对其成球性质进行了检测;利用透析法研究了 mPEG42-b-PMAGP20-co-DOX纳米粒子在不同释放介质(PBS,pH = 5.0, 6.5, 7.4)中的体外药物释放行为;通过激光共聚焦(CLSM)和流式细胞术(FCM)两种方法对mPEG42-b-PMAGP20-co-DOX纳米粒子的细胞摄取行为分别作了定性和定量分析;通过MTT法检测了 mPEG42-b-PMAGP20-co-DOX纳米粒子对HepG2和MCF-7细胞的毒性。结果:实验测得该聚合物-药物轭合物的临界胶束浓度为1.58 ÷ 10-2 mg/ml;所形成的纳米粒的粒径约为54.84± 0.58 nm;透射电子显微镜观察该纳米粒呈球形且形态完整,粒径大约为20-30 nm; 72小时内在中性(pH7.4)条件下,DOX的释放率为26.58%,而在pH6.5和pH5.0的条件下,DOX的释放率分别增加到了 43.61%和76.48%;在相同的实验条件下,特异性高表达脱唾液酸受体(ASGP-R)的HepG2细胞对含半乳糖的mPEG42-b-PMAGP20-co-DOX纳米粒子的摄取明显高于MCF-7和A549细胞,且mPEG42-b-PMAGP20-co-DOX纳米粒子对HepG2细胞表现出显著的细胞毒性而对MCF-7细胞的毒性相对较小。结论:该聚合物-药物轭合物可在水中自组装形成纳米粒子,且该纳米递药系统具有明显的pH敏感性和肝癌靶向性。二、多功能型介孔二氧化硅纳米载药体系目的:经过一系列的化学反应,借助二硫键在介孔二氧化硅(MSNs)表面修饰上透明质酸(HA),合成一种集还原敏感与主动靶向于一体的纳米递药系统一MSNs/SS/HA。方法:利用透射电子显微镜(TEM)对修饰前后的MSNs进行了表征;通过傅里叶红外光谱(FT-IR)、热重分析(TGA)、N2吸附-脱附等实验方法对修饰前后MSNs的结构和性能进行了验证;以盐酸阿霉素(DOX·HC1)为模型药物,在相同的实验条件下分别将其包载到MSNs和MSNs/SS/HA中,利用荧光分光光度计测定了二者的载药量和包封率,并研究了它们在不同谷胱甘肽(GSH)浓度缓冲溶液中的体外药物释放行为;通过激光共聚焦(CLSM)和流式细胞术(FCM)两种方法对MSNs/SS/HA@DOX的细胞摄取行为分别作了定性和定量分析:通过MTT法检测了 MSNs/SS/HA@DOX纳米粒子对HeLa和L02细胞的毒性。结果:MSNs与MSNs/SS/HA均表现为球形以及孔结构;而且MSNs/SS/HA的粒径大于未修饰的MSNs。HA被成功的连接到了 MSNs表面,并对孔起到了一定的修饰作用。MSNs/SS/HA的载药量和包封率均高于MSNs且MSNs/SS/HA对药物的负载效果较好,在不含GSH的缓冲溶液中,72小时内DOX的释放率为31.02%,在含2 μM和10 mM GSH的缓冲溶液中,72小时内DOX的释放率分别达到了 32.06%和81.66%;而MSNs@DOX在生理条件下,24小时内DOX的释放率为88.77%,表现出突释现象;在相同的实验条件下,特异性高表达CD44受体的HeLa细胞对MSNs/SS/HA@DOX的摄取明显高于正常肝细胞(L02),且MSNs/SS/HA@DOX纳米粒子对HeLa细胞表现出显著的细胞毒性但是对L02细胞的毒性相对较小。结论:MSNs/SS/HA@DOX具有明显的还原敏感性并对DOX起到了缓释作用;并且在中性条件下HA分子可以延迟DOX的释放。经透明质酸(HA)修饰的介孔二氧化硅纳米载药体系可显著增加肿瘤细胞的摄取率及细胞毒性,具有肿瘤靶向性。