【摘 要】
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D-苹果酸（D-malic acid）是一种非天然有机酸,是制药工业的重要手性原料,可用于合成泛酸,β-内酰胺类抗生素,信息素和生物碱等手性药物.生产D-苹果酸的方法分为化学合成法和微生
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D-苹果酸（D-malic acid）是一种非天然有机酸,是制药工业的重要手性原料,可用于合成泛酸,β-内酰胺类抗生素,信息素和生物碱等手性药物.生产D-苹果酸的方法分为化学合成法和微生物转化法.该研究的内容是用微生物转化法生产D-苹果酸.其原理是利用微生物专一消耗L-苹果酸,从而由DL-苹果酸中拆分出D-苹果酸.该研究分为两部分：第一部分是从野生菌株中筛选出一株能专一消耗L-苹果酸的微生物,通过对其种子培养条件和发酵培养条件的不断摸索和优化,确定了最适温度,最适pH,最适震荡速度,最适培养基体积,最适培养基成分和最适底物浓度;对产物进行了初步分离;对菌株进行了初步鉴定.第二部分是通过分子克隆的手段,构建重组菌.研究的焦点是大肠杆菌基因编码的苹果酸脱氢酶（Malate Dehydrogenase,MDH）,该酶能特异地将L-苹果酸转化成草酰乙酸而消耗L-苹果酸.该研究的目的是将编码MDH的基因克隆到表达载体中,构建重组菌.
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