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目的从老瓜头干燥全草70%乙醇提取物中富集镇痛效-毒成分7-脱甲氧基娃儿藤碱(7-Demethoxylophorine,DEM),并优化提取工艺;通过比较醋制前后主要毒性成分挥发油及DEM的变化,为进一步深入阐述老瓜头醋制降毒机理奠定基础;以DEM为指标,优化老瓜头醋制降毒工艺条件,保证临床用药安全。方法70%乙醇微波萃取老瓜头全草16.8 Kg,回收溶剂后,浸膏上001×7型阳离子交换树脂,富集总生物碱,再经由硅胶、Sephadex LH-20等各种色谱技术分离纯化生物碱,利用1H-NMR、13C-NMR和2D-NMR对其进行结构解析,寻找目标化合物。建立DEM的HPLC-UV含量测定方法,以其含量为考察指标,采用四因素三水平L9(34)正交设计优化其提取工艺。以建立的HPLC-UV方法,测定并比较生品与醋制品(陈醋、白醋)甲醇提取物中DEM的含量差异,采用GC-MS对石油醚及二氯甲烷萃取物进行成分分析。以DEM含量为考察指标,采用正交设计L16(45)优化其醋制工艺。结果1.共富集得到总生物碱236.5 g,得率为1.41%,并从总生物碱中分离得到1个生物碱单体(200 mg),经鉴定为目标化合物,得率约为0.25%;2.建立了DEM的HPLC-UV含量测定方法,专属性强,标准曲线线性回归Y=93649X-20052(r=0.9999),在0.11~70.4μg/m L浓度范围内线性关系良好,LLOQ为110 ng/m L,LLOD为33.3 ng/m L。日内、日间精密度及重复性符合测定要求。3.采用正交设计优选的最佳提取工艺为:选用1:10的料液比,80%甲醇超声提取30 min,验证实验测得DEM含量为(348.27±2.8)μg/g(RSD=0.8%,n=3),高于原有试验值。4.陈醋、白醋制品DEM的含量分别较生品显著降低了0.23倍、0.18倍(P<0.01,n=6),陈醋制品比白醋制品下降得更多(P<0.01,n=6)。GC-MS分析结果显示不同炮制品挥发性成分(石油醚提取物)组成基本一致,但醋制后相同组份的峰面积大多明显减小,白醋制品散失最多。陈醋制品二氯甲烷萃取物较生品变化较大,有生品中不含或极微量的成分产生或增加。5.醋制工艺优化结果表明,炮制用醋的浓度对DEM含量影响显著(P<0.05),通过极差直观分析和方差分析结果,确定最佳炮制工艺为A1B4C1D1,即采用稀释为30%醋液,浸泡药材24 h,60℃烘制40 min。结论1.总生物碱在老瓜头全草中的含量较低,DEM的含量仅为0.034%左右,得率低于0.3%,富集难度大。2.醋制老瓜头与生品相比,效-毒成分DEM含量显著下降,同时挥发性成分由于加热大量散失,是醋制减毒的重要机制。3.正交设计优选得到的提取工艺和醋制工艺,方法简便可靠,可为老瓜头的药用和临床用药安全提供参考。