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第一部分糖尿病大血管病变患者外周血白细胞补体调节蛋白CD55和CD59表达的研究
研究背景与目的:
大血管病变是糖尿病患者致死致残的主要原因,其机制仍未完全阐明。有研究提示,糖尿病微血管病变体内CD55和CD59表达降低。然而,在糖尿病大血管病变患者体内CD55和CD59表达、其表达与颈动脉内中膜厚度的关系及他汀类药物对其表达影响尚不清楚。
研究对象与方法:
选自北京同仁医院2007年9月至2008年3月门诊体检及住院病人共89人,其中男性57人,女性28人,平均66±14岁。研究对象分为三组:对照组23人,2型糖尿病组(T2DM)19人,2型糖尿病合并大血管病变组(T2DM-M)47人。根据是否应用他汀类药物,将2型糖尿病大血管病变组进一步分为:他汀组(n=20)和无他汀组(n=27)。采用流式细胞仪检测外周血白细胞亚群(淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞)表面CD55和CD59表达,用彩色多普勒超声诊断仪测定颈动脉内中膜厚度(CCA-IMT、ICA-IMT和BIF—IMT),全自动生化分析仪检测血脂及高敏C反应蛋白(hs-CRP)。
结果:
1.与对照组及T2DM组相比,T2DM-M组外周血中性粒细胞CD55百分率及单核细胞CD59百分率降低(p=0.049和0.033及p=0.038和0.043);与T2DM组相比,T2DM-M组中性粒细胞CD59百分率降低(p=0.032)。与对照组及T2DM组相比,T2DM-M组外周血白细胞CD55及CD59平均荧光强度(MFI)有下降趋势(p>0.05)。
2.T2DM-M组CCA-IMT和ICA-IMT值较对照组明显增厚(p=0.009和0.046),T2DM-M组ICA—IMT值也较T2DM组增高(p=0.025),BIF-IMT在三组间无差异(p>0.05)。
3.T2DM组和T2DM-M组hs-CRP较对照组明显升高,T2DM-M组又高于T2DM组(p>0.05)。
4.相关分析表明,CD55和CD59表达水平与年龄及血压负相关(r=-0.245～-0.352,p=0.041～0.003),但与hs-CRP及颈动脉内中膜厚度不相关(p>0.05)。
5.他汀类药物治疗后有上调CD55和CD59表达的趋势,但结果无统计学意义(p>0.05).
6.在T2DM-M组内,未使用他汀类药物组CCA-IMT、BIF-IMT和ICA-IMT有增厚趋势(p>0.05)。
结论:
1.糖尿病大血管病变患者体内外周血白细胞补体调节蛋白CD55和CD59表达下调。
2.补体调节蛋白CD55和CD59表达与颈动脉内中膜厚度不相关。
3.他汀类药物有上调补体调节蛋白CD55和CD59表达的趋势。
研究背景与目的:
糖尿病大血管病变的基本病理变化是动脉粥样硬化。在糖尿病患者,动脉粥样硬化进程加速,但确切机制仍未阐明。早期研究发现,人动脉粥样硬化病变中有补体调节蛋白表达。但在同一个体,与正常动脉组织相比,动脉粥样硬化斑块中CD55和CD59表达无明显变化。近来研究显示,糖尿病合并微血管病变患者外周血白细胞及病变组织中CD55和CD59表达下调。然而,不同个体间正常动脉组织与动脉粥样硬化病变组织中CD55和CD59表达的比较、糖尿病大血管病变组织中CD55和CD59表达情况以及阿托伐他汀钙和苯磺酸氨氯地平对组织中CD55和CD59表达的影响尚未见报道。
研究对象与方法:
雄性6周龄ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠42只,随机分为四组:动脉粥样硬化(AS)组(n=10)；糖尿病动脉粥样硬化(DM-As)组(n=10):按每天55mg/Kg体重腹腔注射链脲佐菌素(STZ),连续5天,一周后测血糖值＞11.1mmol/L即为造模成功；阿托伐他汀钙干预(A)组(n=10):给予阿托伐他汀钙灌胃,每日10mg/Kg体重；苯磺酸氨氯地平干预(B)组(n=10):给予苯磺酸氨氯地平灌胃,每日3mg/Kg体重。野生型雄性6周龄C57BL/6小鼠12只为对照组:C57BL/6小鼠12只,给予蒸馏水灌胃。运用免疫组织学方法和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术,来观察补体调节蛋白CD55和CD59在小鼠主动脉组织中的蛋白水平和基因水平的表达变化；同时探讨阿托伐他汀钙和苯磺酸氨氯地平对CD55和CD59表达的影响。
结果:
1.与C57BL/6组相比,AS组斑块面积增加,但无统计学意义(P=0.134),DM-AS组斑块面积明显增加(P=0.000)；DM-AS组较AS组亦明显增加(P=0.009):A组斑块面积较C57BL/6组增加(P=0.005),较DM-AS组减少,但无统计学差异(P=0.186):B组较DM-AS组斑块面积明显减少(P=0.000)。A、B两组斑块面积比较,P=0.015。
2.免疫组织化学染色及免疫荧光染色显示,与C57BL/6组相比,AS组CD55和CD59表达强度增强,DM-AS组CD55和CD59表达强度有减弱趋势。分别给予药物阿托伐他汀钙及苯磺酸氨氯地平干预8周后,A组及B组CD55和CD59表达强度均有增强趋势。
3.CD55和CD59mRNA相对表达量统计结果显示,与AS组相比,C57BL/6组、DM-AS组及A组CD55 mRNA相对表达量降低(P值分别为:0.041,0.045,0.036),B组也有下降趋势(P=0.051)；CD59mRNA相对表达量降低更为明显(P值分别为:0.016,0.013,0.009和0.014).C57BL/6组、DM-AS组、A组及B组之间,CD55和CD59mRNA相对表达量无统计学差异(p>0.05)。
结论:
1.与C57BL/6小鼠相比,ApoE-/-小鼠主动脉组织中CD55和CD59表达上调,糖尿病ApoE-/-小鼠主动脉组织中CD55和CD59表达有下调趋势。
2.与ApoE-/-小鼠相比,糖尿病ApoE-/-小鼠主动脉组织中CD55和CD59表达下调。
3.阿托伐他汀钙和苯磺酸氨氯地平有上调糖尿病ApoE-/-小鼠主动脉组织中CD55和CD59表达的趋势。