西藏南部地区热泉微生物多样性及其产纤维素酶和几丁质酶的研究

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由于西藏地区地处地中海-喜马拉雅地热带,同时又受亚欧板块和印度洋板块的相互挤压,因而拥有丰富的地热资源。在西藏全境范围内,大小热泉700多处,分布广泛,但主要集中在藏南地区,所以本论文选取了以塔格架和曲卓木两热泉区作为微生物多样性的研究对象。首先,以两样点的10个样品进行高通量测序,结合热泉的地球化学参数分析其微生物多样性。表明西藏热泉环境的微生物群落结构与其他环境具有显著的差异,细菌的优势类群主要是绿弯菌门(Chlorflex)和产水菌门(Aquificae)等,古菌的优势类群是Parvarchaeota和泉古菌门(Crenarchaeota)。两样点的微生物多样性极为丰富,存在着多种的未知类群;地理因素并不是决定微生物群落结构的限制因子,而是与其他环境因子一同决定微生物群落结构;结合地球化学参数分析显示,温度对微生物群落的结构具有很大的影响,以及Li+、SO42-、Br-、Cl-、NH4+、K+、F-等8种离子和Al、Be、Zn、Cu、Ge、Sr、Bi和U等8种微量元素影响着微生物的群落结构。由此可见,热泉诸多的环境因子造就了其复杂的微生物群落结构。其次,以广范围的温度和接近于中性的pH作为选取样品的依据,从两个热泉区的多个样品中各选取了 5个样品作为纯培养分离的材料。其结果显示,分离菌株的多样性受样品温度的影响呈规律性的变化,即塔格架样点样品的温度与多样性呈正相关,曲卓木样点则呈现相反的现象。纯培养分离共分离得到382株菌株,分布于6个门,7个纲,9个目,12个科,24个属以及56个种;探讨了 Biolog ECO微孔板法对微生物分离的影响:选取了分离菌株多样性较好的两个样品,即TGJ 3和QZM 6进行研究,结论发现,该方法相较于传统分离法,对微生物资源的挖掘具有一定的作用:与此同时,对Altererythrobacter属的两个新种YIM 75003T和YIM 75004T进行了多相分类鉴定,并命名为Altererythrobacter lauratis和Altererythrobacter palmitatis。最后,对具有代表性的86株菌,进行了几丁质酶和纤维素酶活性的筛选和测定。结果显示,阳性菌株分别占到了总菌株的41.9%和30.2%,并得到了三株具有几丁质酶活性较高的菌株以及一株具有纤维素酶活性较高的菌株。
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