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第一部分一种改良的猪急性坏死性胰腺炎模型的建立目的探讨一种理想的空肠内给药治疗急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)动物模型的制备。方法选择太湖梅山猪,随机分成急性坏死性胰腺炎组(ANP)(n=4)和对照组(C)(n=4),两组均在开腹直视下经鼻置入鼻空肠管。采用逆行胰管穿刺注射5%牛黄胆酸钠1ml/kg(压力100mmHg),诱导制备ANP模型。C组仅行胰管插管不注射任何药物。观察各组术后一般情况;术后6h行腹部CT平扫加增强扫描,观察胰腺影像学改变;术前30min、术后0h、6h、24h、48h、72h检测血清淀粉酶(serum amylase, sAMY)活性;术后72h处死动物,显微镜下观察胰腺、肺病理学变化及胰腺凋亡细胞,并计算凋亡指数。结果ANP组腹部CT扫描可见胰腺组织明显坏死,胰周渗出明显;ANP组sAMY活性较C组明显升高(P<0.05);ANP组胰腺、肺病理学评分及胰腺凋亡指数与C组相比有显著升高(P<0.05)。结论在猪的ANP模型上成功置入鼻空肠营养管,为今后研究肠内给药在ANP中的应用建立了一种简单、创伤小、可重复性的动物模型。第二部分7.5%氯化钠对猪急性坏死性胰腺炎肠屏障功能及细菌易位影响的实验研究目的探讨猪ANP时肠屏障功能的变化和细菌易位的情况,探讨7.5%氯化钠空肠内灌注对ANP肠屏障功能及细菌易位的影响及其可能的机制。方法选择太湖梅山猪,随机分成对照组(C)(n=4)、急性坏死性胰腺炎组(ANP)(n=4)、生理盐水治疗组(NS)(n=4)、7.5%氯化钠治疗组(HS)(n=4)。各组均在开腹直视下经鼻置入鼻空肠管。采用逆行胰管穿刺注射5%牛黄胆酸钠1ml/kg(压力100mmHg),诱导制备ANP模型。C组仅行胰管插管不注射任何药物。HS、NS组于制模后1h经鼻空肠管分别滴注7.5%氯化钠、0.9%氯化钠200ml,滴速1.5ml/min,滴注2h,给药3d。术后72h处死猪。观察各组术后一般情况;术前30min、术后0h、6h、24h、48h、72h监测动物肠鸣音、体温变化;检测sAMY活性和血清钠离子水平;动态比浊法检测血浆内毒素水平;ELISA法检测血清TNF-α、IL-6浓度;分光光度法检测血清及回肠组织匀浆中二胺氧化酶(diamine oxidase, DAO)活性;取猪外周血、腹水、肠系膜淋巴结、肝、胰腺、脾脏、肺组织进行细菌培养,并计算易位率;观察胰腺及回肠黏膜病理学变化及回肠黏膜凋亡细胞,并计算凋亡指数;RT-PCR检测回肠黏膜组织TLR4、TNF-α及IL-6-mRNA表达。结果ANP组、NS组和HS组肠鸣音较C组明显减弱,体温明显升高,HS组肠鸣音和体温较ANP组、NS组恢复快(P<0.05);ANP组、NS组和HS组sAMY活性较C组明显升高(P<0.05),HS组sAMY较ANP组、NS组有所降低,但无统计学意义(P>0.05);ANP组、NS组和HS组血浆内毒素水平较C组明显升高(P<0.05),HS组血浆内毒素较ANP组、NS组明显降低(P<0.05);ANP组、NS组和HS组回肠组织匀浆DAO水平较C组明显降低,血清DAO水平较C组明显升高(P<0.05),HS组回肠黏膜DAO水平较ANP组、NS组升高,血清DAO水平较ANP组、NS组降低(P<0.05);细菌培养C组阳性率低,ANP组、NS组细菌培养阳性率分别为64.3%、53.6%,HS组细菌易位率(35.7%)低于ANP组和NS组(P<0.05);HS组胰腺组织、肠黏膜病理变化较ANP组、NS组轻(P<0.05);HS组凋亡指数明显低于ANP组、NS组(P<0.05);回肠黏膜组织TLR4、TNF-α、IL-6-mRNA在C组表达非常低,ANP组、NS组表达明显增加,HS组表达水平较ANP组、NS组降低(P<0.05)。结论(1) SAP时存在肠屏障功能障碍及细菌易位;(2)7.5%氯化钠溶液空肠内灌注可有效保护肠屏障功能,降低细菌易位;其作用机制可能是通过促进肠动力、降低肠道通透性、下调肠黏膜TLR4的表达,并抑制肠黏膜过度炎症反应来改善肠屏障功能。