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第一部分异氟烷对老年大鼠行为学的影响
目的:通过Morris水迷宫实验，观察老年雄性SD大鼠吸入2％异氟烷(Isoflurane，ISO)30min后在不同时间点行为学的变化，探讨异氟烷对老年大鼠记忆能力的影响。
方法:健康雄性15月龄SD大鼠(n=36)，随机分为6组，n=6，分别为A组（空白对照组，空气组）、O2组（氧气组）、T1（吸入ISO苏醒后2h组）、T2（吸入ISO苏醒后1d组）、T3（吸入ISO苏醒后3d组）、T4（吸入ISO苏醒后7d组）。(1) ISO吸入前先进行5d Morris水迷宫定位航行适应性训练，记录逃避潜伏期(s)和总路程(cm)。第6d进行空间搜索实验，记录大鼠120s内在平台象限停留时间、平台象限停留路程占总路程百分比、平均速度及经过平台次数。(2)水迷宫训练结束后，A组不进行任何处理，O2组吸入纯氧30min后两组再次行水迷宫实验，观察指标同适应性训练;T1、T2、T3、T4组吸入2％的ISO30min，分别于麻醉苏醒后2h、1d、3d、7d行水迷宫实验，观察指标同适应性训练。
结果:(1)ISO吸入前5d水迷宫定位航行训练结果:①逃避潜伏期(s)为84.7±39.5、54.5±40.1、22.9±20.3、13.0±11.2、8.8±7.3;②总路程(cm)为1716.6±763.8、1279.1±843.2、603.7±447.2、325.7±257.4、242.1±205.2。与第1d比较，第2、3、4、5d逃避潜伏期、总路程明显缩短，有显著性差异(P＜0.01);且随着训练推进，呈进行性缩短趋势。说明大鼠经过训练后逐渐形成了学习记忆，提示造模成功。
(2)定位航行适应性训练结束后第6d空间搜索实验结果为:①平均速度(cm/s)为22.5±4.8、22.9±2.6、19.0±2.4、21.3±3.9、20.1±4.5、19.8±2.9;②经过平台次数（次）为5.7±2.3、5.0±2.8、5.3±2.2、4.8±1.9、4.5±1.6、4.6±1.4;③平台象限停留时间(s)为50.9±5.3、44.4±7.5、56.4±10.4、45.6±5.5、41.2±15.9、43.1±4.1;④平台象限停留路程占总路程百分比(％)为38.2±9.0、36.4±7.3、49.8±12.7、39.5±7.9、40.2±16.1、37.4±6.8。所有大鼠空间搜索实验各项指标均无显著性差异(P＞0.05)。提示各组大鼠经水迷宫训练后学习记忆程度较均衡。
(3)ISO吸入后Morris水迷宫定位航行实验结果:①逃避潜伏期(s)为5.1±3.7、7.8±4.4、17.2±8.2、8.3±4.4、6.8±4.2、6.1±3.2;②总路程(cm)为120.2±81.5、168.9±80.2、458.9±248.3、236.5±127.9、191.7±155.3、182.2±80.1。T1组逃避潜伏期与A组比较明显延长(P＜0.01)，O2、T2、T3、T4组与A组比较无明显差异(P＞0.05)，T1组与T3、 T4、O2组比较延长（P＜0.05）。T1组总路程与A组比较明显增加(P＜0.01)，O2、T2、T3、T4组与A组比较无明显差异（P＞0.05），T1组与T4、O2组比较总路程增加（P＜0.05）。
(4) ISO吸入后Morris水迷宫空间搜索实验结果分别为:①平均速度(cm/s)为20.3±2.1、19.7±5.7、17.8±1.2、24.0±5.1、21.3±3.1、22.7±2.4;②经过平台次数（次）为5.0±2.2、4.3±1.2、3.2±0.8、4.7±1.6、5.7±1.4、4.8±1.5;③平台象限停留时间(s)为52.1±5.7、57.3±4.8、32.3±3.8、53.2±6.6、58.6±8.1、48.7±5.1;④平台象限停留路程占总路程百分比(％)为43.1±6.3、45.5±6.1、26.9±5.5、40.6±6.4、42.6±7.2、37.1±3.3。T1组平台象限停留时间及平台象限停留路程占总路程百分比与A组、O2组、T2、T3、T4组比较增加(P＜0.05)，其他各组比较无明显变化。各组大鼠平均速度及经过平台次数比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。
结论:老年大鼠吸入2％异氟烷30min，在苏醒后2h观察发现大鼠学习记忆能力有一定程度影响，在苏醒后1d记忆出现恢复，继续观察至苏醒后3d、7d记忆能力已恢复平稳。
第二部分异氟烷对老年大鼠NMDAR1、细胞凋亡的影响
目的:通过检测老年大鼠吸入2％异氟烷30min后在不同时间点海马及皮层区N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基1型(N-Methyl-D-Aspartic Acid Receptor1，NMDAR1)与神经凋亡细胞的表达变化，并结合大鼠行为学结果，探讨异氟烷对老年大鼠学习记忆能力的影响及可能的机制。
方法:第一部分行为学实验完成后，取出各组大鼠脑组织。应用免疫组化测定NMDAR1在海马CA1、CA3以及皮层区的表达。TUNEL法检测大鼠海马CA1、CA3及皮层区神经细胞凋亡情况。
结果:(1) NMDAR1平均光密度检测结果分别为:①CA1区:0.291±0.033、0.279±0.028、0.195±0.033、0.255±0.051、0.284±0.021、0.283±0.033。T1组NMDAR1表达低于A、O2、T2、T3、T4组，差异有统计学意义(P＜0.05)，其余各组比较无明显变化。②CA3区:0.270±0.041、0.286±0.026、0.211±0.02、0.266±0.042、0.279±0.014、0.28±0.023。T1组NMDAR1表达低于A、O2、T2、T3、T4组(P＜0.05)，其余各组比较无明显差异。③皮层区:0.26510.023、0.264±0.026、0.283±0.017、0.271±0.016、0.268±0.025、0.267±0.055。各组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
(2)细胞凋亡检测结果分别为:①CA1区6.92±2.93、7.17±2.66、6.58±1.51、5.75±2.01、6.33±1.92、6.08±2.71;②CA3区7.67±2.87、8.42±2.11、7.00±2.13、6.25±3.05、7.75±2.49、5.83±2.79;③皮层区9.42±2.71、8.58±2.88、9.08±3.15、7.92±3.50、8.08±3.42、7.75±3.17。凋亡细胞在CA1、CA3及皮层区各组大鼠表达均无明显差异，其表达变化无规律，在CA1、CA3区02组凋亡细胞表达略高于其他组，但无统计学意义。
结论:老年大鼠吸入2％异氟烷30min，观察大鼠在苏醒后2h海马CA1、CA3区NMDAR1表达下降，苏醒后1d后逐渐恢复，至苏醒后3d、7d已恢复平稳;各组大鼠在皮层区NMDAR1表达无明显变化;老年大鼠吸入2％异氟烷30min对海马及皮层区神经细胞凋亡无明显影响。