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目的通过观察不同浓度槟榔碱干预后体外培养的成纤维细胞(fibroblast,FB)以及Hacat细胞中肝细胞生长因子(hepatocyte growthfactor HGF)及其受体(hepatocyte growth factor recepter,c-met)的表达情况,并对其表达调控机制进行初步探讨,以了解HGF/c-met在口腔粘膜下纤维性变(oralsubmucous fibrosis,OSF)中的发病作用。方法体外培养口腔粘膜成纤维细胞、Hacat细胞,分别经0 ug/ml(对照组),10 ug/ml(G10组),20ug/ml(G20组),40 ug/ml(G40组),80 ug/ml(G80组)浓度的槟榔碱刺激后,采用RT—PCR方法检测榔碱对口腔粘膜成纤维细胞、Hacat细胞产HGFrnRNA、c-metmRNA的影响。结果(1)以未经槟榔碱处理的体外培养的正常口腔粘膜下成纤维细胞为对照组和10,20,40,80ug/ml槟榔碱处理组比较,各实验组肝细胞生长因子浓度明显高于对照组(P＜0.05)。40,80ug/ml较10,20ug/ml组表达增高(P＜0.05),10与20,40与80ug/ml之间表达无差别(P＞0.05)。(2)以未经槟榔碱处理的体外培养的正常口腔粘膜下成纤维细胞为对照组,各实验组肝细胞生长因子受体均呈强阳性表达,各组间表达无差别(P＞0.05)。(3)以未经槟榔碱处理的体外培养的Hacat细胞为对照组和10,20,40,80ug/ml槟榔碱处理组比较,各实验组肝细胞生长因子受体浓度明显高于对照组(P＜0.05),10,20,40,80 ug/ml槟榔碱Hacat细胞分泌的肝细胞生长因子受体水平呈逐渐增高趋势,但差别无明显统计学意义(P＞0.05)。(4)以未经槟榔碱处理的体外培养的Hacat细胞为对照组和10,20,40,80ug/ml槟榔碱处理组比较,各实验组均肝细胞生长因子表达呈阴性。(5)FB表达HGF与Hacat表达c-met存在正相关,相关系数为0.965(P＜0.05)。结论1.槟榔碱促进体外培养的口腔成纤维细胞分泌HGF提示FB对槟榔碱的刺激表现一种对抗细胞毒性反应,HGF/c-met系统参与了细胞的抗损伤修复机制。2.槟榔碱可以诱导体外培养的Hacat细胞表达c-met,HGF在Hacat中无表达,提示槟榔碱也许是一种致c-met突变的因素。3.用槟榔碱分别刺激FB和Hacat细胞,FB细胞表达的HGF与Hacat细胞表达的c-met呈正相关,提示HGF/c-met是上皮——间充质相互作用的体液介质。