论文部分内容阅读
研究目的:为从分子水平探索我省粤东地区食管癌高发病率的原因,了解粤东地区食管癌高发现场患者的抑癌基因p16、Rb蛋白的表达及p16基因的纯合缺失情况,寻找该地区食管癌的相关性分子生物学指标,探讨抑癌基因在该地区食管癌的发生、发展过程中的作用,我们对粤东地区60例食管癌手术切除的肿瘤标本进行检测。 材料和方法:食管癌标本全部来自1998年度粤东地区揭阳市人民医院。p16、Rb蛋白表达、p16基因纯合性缺失及肿瘤细胞中p16基因mRNA信号水平的检测采用免疫组化、PCR及原位杂交技术。统计学处理采用Spss8.0统计软件包进行卡方检验和等级相关分析(α=0.05)。 结 果:1.60例食管癌组织标本中,有26例(43.3%)p16蛋白表达阳性。伴淋巴结转移的20例中有5例(25.0%),无淋巴结转移的40例中有21例(52.5%)表达阳性,二者间差别显著(P=0.043);p16蛋白表达与食管癌分化程度无显著相关,但与浸润深度似有一定关系;有34例(56.7%)Rb蛋白表达阳性,其中33例中分化鳞癌中阳性表达13例(39.4%),25例低分化鳞癌中阳性表达19例(76%),二者间有显著性差异(P=0.006),但Rb蛋白表达与食管癌的浸润、转移无明显相关;p16与Rb蛋白表达之间呈显著的负相关关系(r=-0.483,P=0.000)。2.PCR检测p16基因纯合缺失情况发现60例食管癌组织标本中,外显子2缺失有27例(45%),外显子1缺失有15例(25%),二者均缺失有10例(16.7%)。与免疫组化结果相比,外显子1和2均见扩增带而蛋白表达阴性的有5例(14.4%)。3.使用原位杂交检测的13例食管癌组织中,10例与免疫组化结果相同,杂交信号(mRNA信号)位于细胞的胞浆中。 硕士学位论文 粤东地区食管癌p16、Rb基因表达与… 基因缺失的研究 结 论:1.纯合缺失尤其是外显于2的缺失是粤东地区食管癌组织P16基因蛋白产物丢失的主要原因,而免疫组化结合原位杂交可更好地分析基因表达情况,二者之间的差异表明… 蛋白的不表达还存在其它机制。2.P16与Rb基因的蛋白表达呈显著的负相关关系,两者之间存在负反馈作用。3.本研究结果显示pl6基因表达缺失与食管癌的浸润、淋巴结转移相关。检测患者pl6基因表达对推测患者预后、指导临床治疗有一定的价值和意义。