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放射性肠道损伤一般是临床上盆腔、腹腔等肿瘤患者放射治疗后的常见并发症,同时也是核与辐射突发事件早期重症患者的常见病症之一。目前对其特异性的治疗方法,属于放射医学研究的重、难点问题。TAB182是182 k Da的Tankyrase结合蛋白,属于DNA损伤修复相关蛋白。本课题组前期研究发现TAB182能促进DNA双链断裂修复,敲除TAB182能使癌细胞辐射敏感性增加。辐射防护候选药VND3207是香兰素衍生物,对小鼠放射性肠损伤有防护效果。本论文主要从TAB182对小鼠肠道绒毛和隐窝组织结构、小肠干细胞及类器官放射敏感性的影响,初步探究TAB182调控小鼠肠道组织损伤修复的作用机制,并对VND3207的药物防护作用进行讨论。目的:研究TAB182蛋白分子在正常细胞中及照射后引起小肠组织细胞损伤中的作用,初步探讨TAB182在放射性肠道损伤的机制。方法:（1）对CRISPR-Cas9基因敲除技术敲除TAB182的小鼠采用PCR进行基因鉴定,选择杂合子与杂合子杂交,对TAB182基因敲除型小鼠鉴定并繁育;（2）8 Gyγ射线全身照射6~8周龄正常C57BL/6N小鼠（以下简称“WT”）和TAB182基因敲除型纯合子小鼠（以下简称“HO”）,观察记录30 d内生存情况;（3）12 Gy和15 Gyγ射线全腹部照射雄性及雌性的WT和HO,观察小鼠肠道结构的病理变化,同时,通过免疫组化染色检测小肠干细胞的增殖和凋亡情况;（4）分为对照组（未照射组）和处理组,其中对照组包括WT和HO,处理组包括IR+溶媒+WT、IR+溶媒+HO、IR+VND3207+WT、IR+VND3207+HO四个处理组,每组6只小鼠,处理组在照射前0.5 h灌胃溶媒或VND3207,并给予15 Gyγ射线进行全腹部照射。照射后3.5 d取小肠组织,检测照后小肠组织结构变化。H＆E染色观察处理组小肠组织病理形态学与对照组的差异;（5）分离6~8周龄WT和HO的小肠隐窝培养成类器官,将其暴露于不同剂量（2 Gy、4 Gy和6 Gy）下照射,构建肠类器官辐射损伤模型;在此模型上,照前2 h给予VND3207（或溶剂对照）,观察类器官生长和出芽情况;照射后2 h进行γ-H2AX的免疫荧光（细胞及冰冻切片）实验检测DNA损伤效应;照射后24 h后检测小肠干细胞相关的增殖、干性、凋亡基因的变化情况。结果:（1）鉴定和繁育TAB182基因敲除型小鼠。取子代鼠尾组织消化后提取DNA进行快速PCR鉴定,证明TAB182基因敲除型小鼠繁育成功。（2）8 Gy全身照射后,HO第7 d开始出现死亡,至第13 d全部死亡;而WT也是第7 d开始出现死亡,但一直观察至第30 d时仍有约20%的小鼠存活。（3）HO肠绒毛长度明显较WT短。与对照组相比,HO暴露在12 Gy、15 Gyγ射线下全腹部照射,H＆E染色结果表明,12 Gy照射后小肠绒毛结构完整,排列整齐;15 Gy照射后小肠绒毛长度显著缩短,结构破坏。结果提示15 Gyγ射线全腹部照射可成功建立小鼠肠道损伤模型。在此模型上,照前2 h给予VND3207,照射后3.5 d小肠病理切片结果表明,与对照组相比,VND3207处理组不论是WT还是HO组,小鼠肠绒毛排列整齐,结构完整,绒毛长度恢复到与对照组（未照射组）绒毛长度相近,HO绒毛长度增加的比例高于WT增加的比例。未给药组,小鼠肠绒毛长度显著缩短,结构破坏;（4）免疫组化染色结果显示,小鼠小肠隐窝干细胞增殖在未照射时最为活跃,与对照组相比,照射后增殖活性呈时间依赖性降低,到3.5 d时增殖活性达到最低值;照射引起HO小肠隐窝干细胞凋亡阳性细胞数显著增加,且始终高于WT凋亡阳性细胞数。（5）与WT小肠类器官相比,HO肠类器官3 d后生长速度显著较WT减缓;不同剂量照射均可抑制小肠类器官生长,照射对HO小肠类器官影响更显著。HO小肠类器官在2、4和6 Gy照射后前3 d均出现明显的生长缓慢现象,表现为类器官表面积几乎不增长,且在3 d后逐渐恢复生长。WT小肠类器官在2、4、6 Gy照射后也出现生长减缓的现象,与HO组相比,类器官表面积明显增大。与对照组相比,VND3207对WT和HO类器官表面积没有明显影响,但可以改善照射对小肠类器官的生长和出芽的抑制作用。实时定量PCR结果显示VND3207促进辐射损伤小鼠肠类器官增殖,抑制凋亡,与对照组相比,VND3207更能促进HO组肠类器官照射后干细胞的增殖活性。结论:（1）15 Gyγ射线全腹部照射可成功建立小鼠放射性肠道损伤模型;6 Gyγ射线照射肠类器官可成功建立肠类器官辐射损伤模型。（2）TAB182基因敲除影响肠道绒毛结构、类器官的生长及增加放射敏感性。HO肠绒毛长度明显较WT短,HO肠类器官3 d后生长速度显著较WT减缓;8 Gy全身照射HO和WT,HO对辐射更敏感;15 Gyγ射线辐射促进HO小肠隐窝细胞凋亡增加;6 Gy照射HO肠类器官,照射后3 d内表面积增加明显减缓。（3）VND3207可以保护HO肠道结构的损伤,促进电离辐射后小肠类器官的生长和出芽,促进辐射损伤小鼠肠类器官增殖,抑制凋亡。