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巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是发现能抑制巨噬细胞随机迁移的关键细胞因子,在炎症反应中发挥重要作用。本文通过同源序列法,设计扩增基因的特异性引物,利用RT-PCR技术克隆了梅山猪MIF基因全编码序列及基因组序列;用辐射杂种细胞学技术(RH)对基因进行染色体定位;采用生物信息学和分子生物学技术分析其核苷酸和氨基酸序列;用实时定量PCR方法分析MIF基因的组织表达谱;构建基因的真核表达载体并实现了离体细胞超表达。根据HTGS数据库信息,克隆到猪MIF基因5′侧翼长2000bp的启动子序列,并用双荧光素酶报告基因系统检测猪MIF启动子活性。通过不同浓度的罗格列酮(10-5,5×10-5,10-6mol/L)刺激或将pcDNA-PPARγ2载体转染NIH3T3成纤维细胞,分析PPARγ2对MIF基因表达调控的影响。结果表明:(1)克隆得到梅山猪MIF基因全长编码区348 bp,编码115个氨基酸,克隆到两个内含子、三个外显子和3′非翻译区共761 bp的基因组片段;(2)猪MIF基因定位在第14号长臂21区;(3)MIF基因在组织中广泛表达,胃中表达量最高,脾脏其次,肌肉和心脏中表达量最低;(4)成功的构建pIRES2-MIF真核表达载体,并在NIH3T3成纤维细胞系中实现超表达;(5)克隆扩增到MIF基因启动子序列,构建启动子活性荧光素酶检测载体,证实该片段有启动子活性;(6)在NIH3T3细胞中,PPARγ2能够上调MIF基因的转录。