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肠道微生物参与人体多项生理功能,有助于中药药效发挥,为研究超微七味白术散对菌群失调腹泻疗效的微生态调节作用及其机理,本研究通过灌胃硫酸庆大霉素和头孢拉定对小鼠进行肠道菌群失调造模,然后通过灌胃给药全量七味白术散传统汤药和超微七味白术散1/2剂量的汤药对造模小鼠进行治疗,分别研究了超微七味白术散对菌群失调腹泻小鼠肠道厌氧微生物功能多样性、分子多样性及乳酸杆菌多样性的影响情况,并分析了1株与超微七味白术散相关的肠道酵母菌,得到了如下结果,为临床应用提供科学依据：提取肠道活体微生物,运用Biolog微生物自动分析系统研究肠道微生物的功能多样性。各组的颜色平均变化率(AWCD)于培养72 h后趋于稳定,其中1/2剂量的超微汤药治疗组的AWCD最大,正常组次之,传统汤药治疗组再次之,模型组最小；Shannon指数和Simpson指数为正常组最大,且与其他各组差异极显著(P<0.01),七味白术散1/2剂量超微汤药治疗组的Shannon均匀度和McIntosh指数最大,Shannon均匀度与正常组差异不显著(P>0.05),其余指标与各组都存在显著性差异(P<0.01或P<0.05)。聚类分析和主成分分析表明抗生素的抑菌作用明显,影响了小鼠肠道微生物的对碳源的利用,七味白术散传统汤药治疗组和1/2剂量超微汤药治疗组的小鼠肠道微生物的功能多样性逐渐接近正常组,但两种汤药对肠道微生物功能多样性的调控不尽相同。超微七味白术散1/2剂量对肠道厌氧微生物的功能多样性的调控作用优于传统七味白术散全量汤药。提取肠道微生物宏基因组,对不同组别肠道内容物中微生物的16S rDNA进行了PCR克隆分析,并建立了相应的基因文库。结果表明,肠道微生物中的正常菌群有乳酸菌(Lactobacillus johnsonii),屎肠球菌(Enterococcus feacium),梭状芽孢杆菌(Clostridium sp.),黏液真杆菌(Blautia producta),毛螺旋菌(Anaerostipes sp),腐生性葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus subsp)和不能培养的细菌(Uncultured bacterium),其中以乳酸菌为主要优势菌,占全部细菌DNA克隆数的61.90%,模型组乳酸菌的比例较正常组明显下降,条件致病菌的比例明显上升,通过灌胃给药后,七味白术散传统汤药治疗组和1/2剂量超微汤药治疗组的乳酸菌均有所恢复,其中1/2剂量超微汤药治疗组的乳酸菌比例与正常组较为接近；计算各组菌群的多样性(H)、丰富度(S)、均匀度(E)及优势度指数(D)可知,1/2剂量超微汤药治疗组各项指数与正常组最为接近；通过建立聚类树发现,正常组可与1/2剂量超微汤药治疗组聚为一类。说明正常组与1/2剂量超微汤药治疗组肠道微生物的基因文库及多样性最为接近,超微七味白术散1/2量汤剂的治疗效果优于七味白术散传统汤剂。提取肠道微生物宏基因组DNA,用乳酸杆菌特异引物对不同组别肠道内容物中微生物的16S rDNA进行PCR扩增,通过Hha I, Rsa I、 Sam I和HindⅢ等酶切后进行ARDRA分析。结果表明,正常组和七味白术散1/2剂量超微汤药治疗组OTUs数大于七味白术散传统汤药治疗组,七味白术散对乳酸杆菌的多样性,均匀度及优势度均有所恢复,通过聚类与主成分分析表明,七味白术散对肠道乳酸杆菌具有一定的调整作用,且超微七味白术散1/2量汤剂的治疗效果优于七味白术散传统汤剂。从实验动物肠道中分离出43株酵母菌,对1株生长受超微七味白术散促进的酵母菌采用形态学、生理生化和分子生物学方法进行了鉴定。该酵母菌的菌落呈乳白色,质地均匀,可形成假菌丝,繁殖方式为多端芽殖,能发酵葡萄糖和D-木糖,不形成类淀粉物质,同化葡萄糖、蔗糖、D-木糖、果糖、山梨醇,不利用硝酸钾和尿素,脲酶试验为阴性,18SrDNA序列(GenBank登录号为JQ217075)与伯顿毕赤酵母(Pichia burtordii)(序列号：AB158656)同源性为99%,26S rDNA序列(Gen Bank登录号为KC192660)与伯顿毕赤酵母(序列号：U45712.1)同源性为100%。系统发育树结果表明该菌与伯顿毕赤酵母处于同一进化分支,相似性达99%,将该菌鉴定为伯顿毕赤酵母。