【摘 要】
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以高山被孢霉（Mortierella alpina）3.12824为出发菌株,玉米糖为碳源,通过单因素实验和正交实验对高山被孢霉生产多不饱和脂肪酸发酵工艺和提取工艺进行优化,通过老化工艺进一步提升菌株油脂产量。最终对提取的油脂进行精制,找出其最佳脱胶及脱酸条件,主要内容包括:（1）通过单因素实验和正交实验,确定高山被孢霉摇瓶发酵最佳条件。研究表明:当碳源玉米糖质量浓度80.0 g/L、氮源酵母膏质
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以高山被孢霉（Mortierella alpina）3.12824为出发菌株,玉米糖为碳源,通过单因素实验和正交实验对高山被孢霉生产多不饱和脂肪酸发酵工艺和提取工艺进行优化,通过老化工艺进一步提升菌株油脂产量。最终对提取的油脂进行精制,找出其最佳脱胶及脱酸条件,主要内容包括:（1）通过单因素实验和正交实验,确定高山被孢霉摇瓶发酵最佳条件。研究表明:当碳源玉米糖质量浓度80.0 g/L、氮源酵母膏质量浓度12.0 g/L、KH2PO43.8 g/L、Na NO33.4 g/L、Mg SO4·7H2O 0.5 g/L时,4种因素影响生物量主次顺序为培养天数＞培养温度＞装液量＞p H,4种因素影响油脂产量主次顺序为培养天数＞装液量＞培养温度＞p H,最佳发酵条件为装液量200 m L/L、发酵时间7 d、发酵温度25℃、p H 6.5,此条件下菌株生物量和油脂产量分别达到26.05 g/L和9.37 g/L。经气相色谱分析高山被孢霉产出的油脂,组成成分为软脂酸（C16:0）、硬脂酸（C18:0）、油酸（C18:1）、亚油酸（C18:2）、十八碳三烯酸（C18:3）、花生三烯酸（C20:3）、花生四烯酸（C20:4）、二十二烷酸（C22:0）,油脂中不饱和脂肪酸C18:1、C18:2、C18:3、C20:3、C20:4的含量分别为17.72%、5.73%、0.75%、5.83%、39.93%,含量总和超过69.00%,其中多不饱和脂肪酸C18:2、C18:3、C20:3、C20:4的含量超过52.00%,花生四烯酸含量最为丰富,达到39.93%。（2）通过单因素实验对高山被孢霉发酵罐发酵温度和通气比进行考察,得出最佳发酵条件后分别采用一次性补料、恒速补料方式进一步优化发酵条件,研究表明:培养液为碳源玉米糖质量浓度80.0 g/L、氮源酵母膏质量浓度12.0 g/L、KH2PO43.8g/L、Na NO33.4 g/L、Mg SO4·7H2O 0.5 g/L,发酵温度25℃、通气比1:1,采取恒速补料方式发酵7 d,高山被孢霉生物量和油脂产量达到最大值,分别为33.50 g/L和13.16 g/L。（3）针对高山被孢霉油脂的提取,设计单因素实验和正交实验确定索氏提取的最佳提取条件。为进一步提高油脂产量,又通过单因素实验确定高山被孢霉菌体最佳老化时间和老化温度。研究表明:影响高山被孢霉提取率3因素主次顺序为液料比＞温度＞时间,最佳工艺参数是液料比20:1、提取时间9 h、提取温度75℃,在此条件下,高山被孢霉油脂提取率为39.25%。通过索氏提取最佳工艺对高山被孢霉菌体进行老化工艺研究,结果表明:过滤不干燥的菌体可做为老化工艺最佳菌体,最佳老化时间为6 d,最佳老化温度为20℃,此条件下可得油脂产量11.25 g/L,与未老化菌体油脂产量9.37 g/L相比提升了20.06%。（4）对提取后的高山被孢霉油脂的精制条件展开研究,通过单因素实验和正交实验确定高山被孢霉油脂脱胶和脱酸的最佳条件,研究表明:影响毛油脱胶的3因素主次顺序为磷酸溶液添加量＞脱胶温度＞加水量,最佳脱胶条件:磷酸溶液添加量占油重0.9%,加水量占油重6.0%,脱胶温度为60℃,使用最佳脱胶条件,脱胶率可达到81.56%。影响高山被孢霉脱胶油脱酸的3因素主次顺序为脱酸温度＞超碱量＞脱酸时间,最佳脱酸条件:脱酸温度60℃、超碱量0.3%油重、脱酸时间50 min,使用最佳脱酸条件,脱酸率可达到81.54%。
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