目前金线莲组培培养基的成分主要包括无机盐、碳源、维生素、有机附加物和多种植物激素,随着人们对金线莲的了解和健康意识的增强,组培金线莲的有效性和安全性日益受到重视。本课题旨在探究天然有机物质在金线莲组培上的应用,以双孢蘑菇罐头加工预煮液为天然有机物质,系统分析其主要营养成分,并以其作为主要成分设计金线莲组培培养基配方,从产量、产品有效成分和细胞毒性等指标进行分析评价,得到以下结果:1.分析发现Brix=65%的双孢蘑菇预煮浓缩液中蛋白质、多糖、氨基酸态氮含量分别为38.91g/kg、40.65 g/kg、46.46 g/kg、16.05 g/kg;COD检测为540.29g/L;同时检测得到样品干基D-甘露醇含量为32.16%;利用氨基酸分析仪检测Brix=45%样品中含有17种氨基酸,氨基酸总量高达4.18%。可见双孢蘑菇罐头加工预煮液富含营养物质,具备组培金线莲可利用的营养物质基础。2.采用响应面法筛优选金线莲组培的培养基配方,在单因素实验基础上选取实验因素与水平,利用响应面法的实验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法进行分析并获得了最优的金线莲组织培养培养基配方:MS基本培养基倍数0.53、双孢蘑菇浓缩液含量为0.68%、蔗糖浓度2.89%,在此条件下得到金线莲单瓶产量为33.90g,与理论预测值基本一致,而对照MS培养基单瓶产量为24.43g,对照含激素的MS培养基单瓶产量为27.62g。可见采用双孢蘑菇预煮液配制培养基培养金线莲能够显著提高金线莲产量。3.采用分光光度法、HPLC等方法检测双孢蘑菇预煮液培养的金线莲主要活性成份。发现双孢蘑菇预煮液培养的金线莲芦丁和水仙苷含量比传统培养基培养的金线莲高。采用苯酚硫酸法分析金线莲热水浸提物干基总糖和粗多糖含量,发现双孢蘑菇预煮液培养的金线莲总糖、多糖含量分别为71.05%、39.41%,而传统培养基培养的金线莲总糖、多糖含量分别为61.34%、23.61%,差异显著。双孢蘑菇预煮液培养的金线莲乌头碱含量0.0509%,而传统培养基培养的金线莲为0.0116%。结果可见:双孢蘑菇预煮液培养的金线莲与传统培养基培养的金线莲在主要活性成份含量上有显著性提高。通过L929小鼠成纤维细胞毒性测定也进一步得到验证。