低温胁迫下香蕉幼苗叶片生理指标及差异蛋白表达研究

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香蕉是芭蕉科(Musaceae)芭蕉属(Musa)植物,原产于亚洲,是世界上三大水果之一,也是许多国家重要粮食作物。低温是众多逆境胁迫中相当恶劣的一种,香蕉的产量与品质常年受其严重影响。在研究香蕉抵御低温的机制、提高香蕉抵御低温的能力、培育香蕉耐冷品种的大环境下,本研究通过人工模拟低温环境的方法,对桂蕉6号幼苗进行持续低温胁迫,测定胁迫过程中的生理指标,并采用双向电泳技术,结合质谱数据的生物信息学分析,对桂蕉6号幼苗低温胁迫下的响应进行了初步的研究。主要研究结果如下:(1)在低温胁迫过程中,桂蕉6号幼苗叶片形态发生变化,叶片上出现冷褐色斑点,叶尖卷曲,叶缘失水、萎蔫甚至变黄;叶片中丙二醛含量在胁迫时间中段有峰值,总体呈现先增加后减少的趋势;脯氨酸含量持续增加,但胁迫中段增加幅度减小;可溶性糖含量持续增加,且随着胁迫时间的延长,增加越来越显著;可溶性蛋白含量的整体呈增加趋势,中间有出现降低情况。可见桂蕉6号具有较强的低温敏感性,容易受低温胁迫影响,此外,可溶性糖含量和可溶性蛋白含量比较适合用来作为研究低温胁迫下香蕉幼苗叶片生理变化。(2)分别用改良的TCA/丙酮法和酚抽提法提取低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片的组织蛋白,二者垂直电泳效果以及提取效率的对比结果表明,酚抽提法更适合提取香蕉叶片总蛋白。(3)建立桂蕉6号幼苗叶片差异蛋白双向电泳体系,分析得到有16个明显表达差异的蛋白点,其中8个上调,7个下调,经过低温处理的幼苗叶片特有的有1个,成功鉴定9个。进一步分析发现,低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片差异表达蛋白的功能涉及多方面。从生物过程来看,这些差异表达蛋白功能参与得最多的是光合作用、能量代谢和碳水化合物,其次是应激反应,以及蛋白修饰等方面;从分子功能来看,这些差异表达蛋白主要起结合ATP、催化酶活性等作用;从细胞水平上来看,这些差异表达蛋白主要与细胞结构的支撑以及相关细胞器膜的结构的变化有关。
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