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本试验分为两个部分:四种糖对凡纳滨对虾生长代谢、免疫及肠道菌群的影响,三种糖作为碳源在两种温度条件下对芽孢杆菌和双歧杆菌的影响两个部分。通过研究不同的糖作为碳源对凡纳滨对虾生长代谢、免疫和肠道菌群以及对肠道常见益生菌增殖的影响,能够为今后的养殖及饲料中微生物制剂的添加提供理论依据,降低饲料成本,提高养殖产量。实验一:本试验旨在研究四种常见的糖源对凡纳滨对虾生长代谢、肠道消化酶及肠道菌群的影响。选取初始体重为(0.36±0.02)g的凡纳滨对虾为研究对象,从多种糖类中选择常见的四种糖(葡萄糖、果糖、淀粉、蔗糖)作为糖源配制饲料,试验共计4个处理,每个处理3个重复,每个重复40尾虾,养殖周期为56d,每种糖源的添加量为20%。研究表明:(1)凡纳滨对虾的特定生长率和蛋白质效率均存在显著性差异(P<0.05),淀粉组显著高于其他三组(P<0.05),但各组间的饲料系数、存活率、肝体比和含肉率无显著差异(P>0.05)。全虾体营养成分,蔗糖组的粗脂肪显著低于其他三组(P<0.05),葡萄糖组的灰分显著高于其他三组(P<0.05),粗蛋白与水分各组间无显著差异(P>0.05),肌肉体营养成分各组间无显著差异(P>0.05)。(2)各组间己糖激酶(HK)与苹果酸脱氢酶(MDH)的蔗糖组显著高于其他三组(P<0.05),而谷氨酰胺合成酶(GS)与谷草转氨酶(GOT)的淀粉组显著高于其他三组(P<0.05),磷酸果糖激酶(PFK)的果糖组、淀粉组及蔗糖组间无显著差异(P<0.05),但均显著高于葡萄糖组。(3)葡萄糖组的甘油三酯显著高于其他三组(P<0.05),果糖组的血糖显著高于其他三组(P<0.05),而总胆固醇无显著差异(P>0.05)。(4)各组间对虾血淋巴免疫活性具有显著差异(P<0.05),淀粉组的超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合成酶(NOS)、碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于其他三组(P<0.05),而蔗糖组的酸性磷酸酶(ACP)活性显著高于其他三组(P<0.05)。(5)各组间对虾肠道消化酶活性具有显著性差异(P<0.05),脂肪酶(LPS)活性的淀粉组与蔗糖组显著高于葡萄糖组及果糖组(P<0.05),淀粉组与蔗糖组之间无显著差异(P>0.05),而胃蛋白酶(PPS)活性的淀粉组显著高于其他三组(P<0.05)。(6)凡纳滨对虾肠道样本中共检测出微生物18个门类,分类至37纲,75目,125科,195属。各组间的凡纳滨对虾肠道OTU、Ace及chao指数无显著差异(P>0.05),在微生物群落的基本构成中,蔗糖组的种类多于淀粉组个葡萄糖组,shannon指数淀粉组及蔗糖组显著高于葡萄糖组,simpson指数的淀粉组显著低于蔗糖组,而蔗糖组又显著低于葡萄糖组(P<0.05)。(7)门水平上,变形菌门(Proteobacteria)相对丰度蔗糖组较葡萄糖组明显增多,拟杆菌门(Bacter oidetes)与放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度淀粉组较葡萄糖组明显增多,但疣微菌门(Verrucomicrobia)相对丰度各组间无明显差异;在纲水平上,各处理组间的对虾肠道菌群的差异性较显著,淀粉组对虾肠道中黄杆菌(Flavobacteriia)、γ变形菌(Gammaproteobacteria)、放线菌(Actinobacteria)及噬纤维菌(Cytophagia)是明显高于蔗糖组与葡萄糖组。在目水平及科水平上,淀粉组的黄杆菌(Flavobacteria ceae)明显多于另外两组,黄杆菌与红杆菌(Rhodobacteraceae)占比较大。在属水平上,未分类的黄杆菌(Flavobacteriaceae unclassified)占比,淀粉组及蔗糖组均高于葡萄糖组,但此两组间差异不大,但黄杆菌属(Flavobacteriaceae)的淀粉组占比仍旧高于葡萄糖组与蔗糖组,并且各组间的菌属占比差异较大。综上所述,凡纳滨对虾对淀粉和蔗糖的吸收利用优于葡萄糖和果糖,同时,淀粉和蔗糖对凡纳滨对虾肠道菌群多样性存在一定的影响,淀粉和蔗糖为凡纳滨对虾饲料中的适宜糖源。实验二:本试验旨在研究三种糖作为碳源在两种温度条件下对枯草芽孢杆菌及两歧双歧杆菌的影响以及枯草芽孢杆菌的代谢产物对两歧双歧杆菌的生长是否有促进作用。选择常用益生菌枯草芽孢杆菌和两歧双歧杆菌作为试验菌种,采用3×2双因素试验设计,选取28℃、35℃/37℃,葡萄糖、淀粉、蔗糖为碳源,配制成三种液体培养基,实验共计6个处理,每个处理3个重复,进行培养试验。试验分为两个部分:首先,将枯草芽孢杆菌接种至三种培养基中28℃、35℃恒温培养,两歧双歧杆菌接种三种培养基中28℃、37℃培养,分别在24h、48h、72h时测定菌液OD值。第二,将两歧双歧杆菌接种至28℃、35℃培养72h后的枯草芽孢杆菌菌液中,石蜡油隔绝氧,28℃、37℃恒温培养,分别在24h、48h、72h时测定菌液OD值。试验结果显示:(1)糖源在35℃条件下对芽孢杆菌的体外增殖影响显著(P<0.05),淀粉组及蔗糖组OD值显著高于葡萄糖组,在24h时OD值淀粉组又显著高于蔗糖组(P<0.05)。但28℃条件下各组间无显著差异(P>0.05),温度对芽孢杆菌体外增殖影响显著,35℃>28℃(P<0.05),糖源与温度交互作用对芽孢杆菌体外增殖影响显著(P<0.05)。(2)糖源对双歧杆菌体外增殖影响显著(P<0.05),在37℃条件下淀粉组显著高于蔗糖组,蔗糖组又显著高于葡萄糖组(P<0.05),在28℃条件下,淀粉组与蔗糖组的OD值显著高于葡萄糖组(P<0.05)。温度对双歧杆菌体外增殖影响显著,28℃>37℃(P<0.05),糖源与温度的交互作用在24h、72h时影响显著(P<0.05),在48h时无显著影响(P>0.05)。(3)不同糖源培养的芽孢杆菌代谢产物对双歧杆菌体外增殖影响显著(P<0.05),在28℃条件下24h时蔗糖组的OD值显著高于葡萄糖组与淀粉组(P<0.05),48h时淀粉组及蔗糖组显著高于葡萄糖组(P<0.05),72h时各组间无显著差异(P>0.05)。而37℃条件下24h、48h时的OD值淀粉组显著高于蔗糖组,蔗糖组又显著高于葡萄糖组(P<0.05),72h时淀粉组与蔗糖组显著高于葡萄糖组(P<0.05)。综上所述,不同温度条件下不同糖作为碳源对芽孢杆菌及双歧杆菌体外增殖具有一定影响,淀粉和蔗糖是芽孢杆菌及双歧杆菌生长的有利碳源。