【摘 要】
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利用聚合酶链式反应(PCR)扩增小麦黄花叶病毒(wheat yellow mosaic virus,WYMV)RNA1 NIb基因片段,克隆到pET30a(+)上.构建了原核表达载体pENIb,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG
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利用聚合酶链式反应(PCR)扩增小麦黄花叶病毒(wheat yellow mosaic virus,WYMV)RNA1 NIb基因片段,克隆到pET30a(+)上.构建了原核表达载体pENIb,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到高效表达,其蛋白含量约为30﹪.纯化表达产物后,免疫家兔制备抗 血清.经SDS-PAGE和Western-blotting分析,首次获得了小麦黄花叶病毒RNA1 NIb基因编制码蛋白的专化性抗血清.将含有WYMV RNA2 72kDa蛋白编码基因的重组质粒进行酶切、重组 ,克隆到pET30a(+)上,构建了原核表达载体pETP72,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到高效表达,其蛋白质含量约为22﹪.纯化表达产物后,免疫家兔制备抗血清.经SDS-PAGE和Western-blotting分析,首次获得了小麦黄花叶病毒RNA2 72kDa蛋白的专化性抗血清.
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