【摘 要】
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采用RT-PCR,技术从人肝总RNA中分离扩增了490bp的人铜锌超氧化物歧化酶(h-Cu/Zn-SOD)基因的cDNA序列,进行了序列测定,结果和文献报道的一致;构建了CaMV35S启动子驱动h-Cu/Zn-
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采用RT-PCR,技术从人肝总RNA中分离扩增了490bp的人铜锌超氧化物歧化酶(h-Cu/Zn-SOD)基因的cDNA序列,进行了序列测定,结果和文献报道的一致;构建了CaMV35S启动子驱动h-Cu/Zn-SOD基因的植物表达载体PBICuSOD;用三亲交配法将重组质粒PBICuSOD转化到农杆菌LBA4404,转化马铃薯得到转基因植株.PCR和Southern-blot分析证明,h-Cu/Zn-SOD基因已整合到马铃薯基因组中.Western blot分析表明,h-Cu/Zn-SOD基因在转基因马铃薯植株中得到表达.用NBT光还原法测定转基因马铃薯植株中的SOD酶活力,叶中SOD的酶活力为1066.6 U/g.FW(湿重),块茎中SOD的酶活力为1011 U/g.FW.以转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯为材料,研究了在不同NaCl浓度胁迫下其活性氧代谢及保护酶活性的变化.结果表明:在NaCl胁迫下转基因马铃薯植株体内的超氧化物阴离子(O<,2><->)产生速率明显低于对照非转基因马铃薯,超氧化物歧化酶(SOD)活性转基因马铃薯显著高于对照,过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性转基因马铃薯高于对照;转基因马铃薯体内的脂质过氧化产物——丙二醛(MDA)含量显著低于对照.以转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯为材料,研究了在低温胁迫下其活性氧代谢及保护酶活性的变化.结果表明:在低温胁迫下转基因马铃薯植株体内的超氧阴离子(O<,2>·<->)产生速率明显低于对照非转基因马铃薯;超氧化物歧化酶(SOD)活性转基因马铃薯显著高于对照,过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性转基因马铃薯略高于对照;转基因马铃薯体内的脂质过氧化产物——丙二醛(MDA)含量显著低于对照.
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