“双固一通”电针对衰老模型大鼠学习记忆影响及其机制的研究

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目的随着老年化社会的到来,面对其所带来的各种问题,研究如何延缓衰老已成为刻不容缓的事实,尤其是针对老年化所致的学习记忆能力的减退,严重影响着老年人的生活质量。针灸治疗延缓衰老已被证明疗效显著,本课题旨在研究“双固一通”针法对衰老模型大鼠学习记忆的影响及其可能的机制,为针灸临床提供实验依据,并为今后更深入的实验研究打下一定基础。方法选用三月龄SD雄性大鼠30只,按照随机数表法每组10只分为正常对照组(Normal control group,简写为NC)、衰老模型组(Model group,简写为Modle)、“双固一通”电针组(Electroacupuncture treatmentgroup,简写为EA),Model、EA组按每日125mg/kg D-半乳糖连续40天颈背部皮下注射,制造衰老模型,NC组等量注射生理盐水。造模完成,EA组参照李忠仁主编《实验针灸学》取穴“关元”、“后三里”和“百会”,用华佗牌0.35mm×25mm不锈钢毫针针刺,“关元”直刺5~7mm;双侧“后三里”直刺5~10mm,“百会”向后方平刺5mm,接韩式LH202H电针仪,双侧“后三里”隔日交替与“关元”接一对电极,连续被,2Hz,1mA,15min,每周一至周六治疗,周日休息,共4周。治疗结束后,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,共5天,结束第二天处死大鼠,取新鲜海马组织,免疫组织化学方法检测海马钙调蛋白(Calmodulin,CaM)表达水平,蛋白免疫印迹法检测(Western blot)Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Calcium/calmodulin-dependent protein Kinase Ⅱ,CaMKⅡ)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(Cyclic AMP Response Element-Binding, CREB)的表达。结果与NC组相比,Modle组大鼠学习记忆能力显著下降,海马CaM、CaMKⅡ、CREB蛋白含量均降低,差异具有统计学意义(P<0.01)与Modle组相比,EA组大鼠学习记忆能力有明显提高,海马CaM、CaMKⅡ、CREB蛋白含量升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论衰老模型大鼠学习记忆能力较正常对照大鼠显著减退,其海马CaM、CaMKⅡ、CREB表达降低,可能是导致学习记忆能力下降的机制之一,通过“双固一通”电针治疗的衰老模型大鼠学习记忆能力明显提高,海马组织CaM、CaMKⅡ、CREB的表达也明显增多,提示“双固一通”电针可能通过调控海马组织CaM-CaMKⅡ-CREB信号转导通路,从而提高衰老模型大鼠的学习记忆能力。
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