RNA干涉逆转白血病细胞多药耐药的研究

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目的:利用RNA干涉技术(RNA interference,RNAi)特异性抑制和逆转人耐药白血病细胞中多药耐药基因-1(Multidrug resistance gene 1,mdrl)的表达。方法:人工合成编码mdr1小发夹状双链RNA的DNA片段,与pSilencer4.1-CMV质粒连接构建RNAi真核表达载体并采用脂质体介导的方法转染到人耐药白血病细胞K562/A中,用潮霉素B筛选获得阳性克隆。用Western Blotting和RT-PCR检测mdr1基因在K562/A细胞中的表达;用MTT法检测转染细胞对化疗药物的敏感性。结果:上述检测结果表明转染表达小发夹状RNA载体的K562/A细胞中MDR1表达量明显降低,耐药性显著减少。结论:mdr1小发夹状RNA可显著抑制K562/A细胞中的mdr1基因的表达,降低耐药性。此项研究成果对白血病多药耐药性的逆转和白血病的治疗具有重要理论和实际意义。
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