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非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一种与代谢紊乱密切相关的疾病,是以胰岛素抵抗为核心,可产生肝脏脂肪堆积和炎症等症状。近年来,随着果糖日消耗量的增加,世界范围内的NAFLD发病率和患者死亡率呈逐年上升趋势。NAFLD开始于单纯性脂肪变性,进一步逐渐发展为非酒精性脂肪肝炎、肝硬化和恶性肝癌。果糖诱导非酒精性脂肪肝的形成可能与脂肪的堆积、氧化应激、炎症有关,在确定NAFLD的特定病理机制方面仍存在困难。有研究表明泽泻提取物能够有效地调节肝脏的脂质,糖代谢,控制肝脏损伤,具有抗炎,抗氧化应激,抗纤维化等作用,但其药效物质基础还不明确。因此我们以泽泻提取物对果糖诱导小鼠肝损伤的保护作用及物质基础展开深入研究。本实验在果糖诱导小鼠肝损伤模型基础上,通过泽泻提取物给药干预后,基于生化指标、肝脏病理切片、代谢组学的研究,深入挖掘潜在的生物学信息,同时利用化学分离、液质联用技术快速表征其中的单体化合物,进一步阐述泽泻提取物可以减轻果糖对小鼠肝损伤的作用及药效物质基础。在果糖诱导小鼠肝损伤模型的基础上,造模并给予高、低浓度泽泻提取物干预13周后,与模型组相比,给药高剂量组小鼠的体重有下降趋势,并具有统计学意义;给药组的餐后血糖有下降趋势,均具有统计学意义。血清生化指标结果显示泽泻提取物能够降低血清TG、TC、LDC-C、ALT、UA的相对含量。组织生化指标结果显示,泽泻提取物能够显著降低肝脏中TC、LPS、TNF-α的相对含量,具有统计学意义;同时泽泻提取物可降低小肠中LPS的相对含量。肝脏病理切片结果表明,果糖水可诱导小鼠肝脏组织发生炎症细胞浸润、肝细胞肿大、脂肪变性的病变,给药组可以明显改善肝脏的炎症程度、细胞形态和脂肪变性程度。基于~1H-NMR肝脏代谢组学技术从肝脏组织中鉴定了52种内源性代谢物,筛选出32种差异代谢标志物与果糖诱导肝损伤作用相关(模型组vs空白组),代谢通路主要富集在氨基酸代谢、糖代谢、脂代谢、谷胱甘肽代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢等。提示果糖可造成小鼠肝脏糖脂代谢紊乱和细胞因子分泌,与模型组相比,泽泻给药组主要影响了26种代谢物的含量,其中模型组和空白组、泽泻给药组和模型组之间共同筛选到了21种差异代谢物。与模型组相比,泽泻给药组能显著将其中16种差异代谢物调归正常代谢水平,且具有统计学意义。从血清、组织生化指标、肝脏病理切片和代谢组学三方面的指标综合评价了泽泻提取物减轻果糖对小鼠肝脏损伤的作用。本实验通过植物化学分离的手段,借助薄层层析、开放型色谱柱、制备液相色谱、高效液相色谱、核磁共振波谱、高分辨质谱、旋光仪、原二色谱等方法从泽泻提取物中分离、鉴定得到10个化合物,其中三萜类(泽泻醇C 23-乙酰酯、泽泻醇B 23-乙酰酯、泽泻醇F、泽泻醇F 24-乙酰酯、泽泻酮23-乙酰酯),倍半萜类(1S,4R,5R,10S-guaianediol、1S,4S,10S-calamusin I),生物碱类(1H-indole-3-carboxylic acid),脂肪酸类(十六烷酸),甾体类1个(β-谷甾醇)。利用高分辨质谱快速表征泽泻提取物中的化学成分,推测了36种,其中三萜类33种。研究报道泽泻提取物可抑制单纯性脂肪变性,抑制脂肪因子和细胞因子的分泌,改善内质网应激,其中泽泻醇B 23-乙酰酯可以有效的调节脂代谢、糖代谢、抑制氧化应激的产生、改善肝脏炎症和纤维化。本文通过对泽泻提取物减轻果糖诱导小鼠肝损伤的药效学评价、化学成分的分离鉴定以及推测其化学成分,初步证明泽泻提取物能够改善果糖诱导的肝损伤作用,泽泻药材组分用于非酒精性脂肪肝的预防和治疗提供了研究依据,为中药泽泻的进一步研究奠定基础。