本文以超聚硒植物壶瓶碎米荠为研究材料,主要针对其中含硒化合物(蛋白质、多糖、黄酮)的提取工艺;并在此基础上为了充分利用壶瓶碎米荠中的硒,对提取残渣进行进一步酶解反应,并得出最佳酶解工艺。同时对壶瓶碎米荠进行外源硒栽培并提取其黄酮,并对其功能性进行一定的研究。本文主要总结如下:1.采用低温提取法得出壶瓶碎米荠的含硒粗蛋白,以高温提取—水提醇沉法得出壶瓶碎米荠的含硒粗多糖和含硒粗黄酮;采用硫酸苯酚法、考马斯亮蓝比色法、铝盐显色法、原子荧光光谱法分别对蛋白质、多糖、黄酮及硒进行测定;通过单因素及正交试验优化出一套完整的壶瓶碎米荠实验室复合提取工艺。该提取工艺为:(1)低温蛋白提取工艺为提取温度50℃,提取时间3 h,料液比1:25 g/mL,提取次数1次;(2)高温水提多糖工艺为料液比1:35 g/mL,提取温度90℃,提取时间3 h,提取次数1次;(3)高温醇提黄酮工艺为提取时间4 h,提取温度85℃,料液比1:30 g/mL,乙醇浓度50%。在此工艺条件下得出壶瓶碎米荠蛋白质含量为23.96 mg/g,蛋白质中硒含量为125.77μg/g;多糖含量为36.88 mg/g,多糖中硒含量为29.81μg/g;黄酮含量为7.57 mg/g,黄酮中硒含量为9.26μg/g。2.对壶瓶碎米荠提取含硒化合物后的残渣进行酶解提取硒的研究,试验中采用纤维素酶和果胶酶对植物细胞中存在于纤维素和果胶中的硒进行专一性酶解;通过单因素与正交试验优选出最佳工艺。结果显示,纤维素酶最佳酶解工艺为:酶解温度60℃,纤维素浓度3.0%,酶解pH=5.0,酶解时间90 min,此工艺条件下硒溶出率为51.32%。果胶酶最佳酶解工艺为:酶解时间90 min,酶解温度40℃,酶解pH=3.5,果胶酶浓度7.0%,此工艺条件下硒溶出率为30.21%。3.通过体外自由基清除效果对壶瓶碎米荠黄酮进行抗氧化能力测定,试验显示:壶瓶碎米荠含硒粗黄酮对自由基具有一定的清除作用,在试验考察的自由基中,除超氧阴离子外其余均显示出良好的抗氧化效果且随着剂量的增加呈现出良好的线性;对羟自由基具有显著的清除效果,清除率稍高于芦丁且显著高于Vc;在低浓度时,对DPPH的清除效果显著高于芦丁而略低于Vc,高浓度时基本与Vc持平;在低浓度范围内,普通粗黄酮与Vc总还原力差异不显著,且显著低于含硒粗黄酮,在高浓度时两种粗黄酮与Vc总抗氧化力基本一致。通过小鼠体内抗氧化试验对壶瓶碎米荠黄酮进行抗氧化能力测定,以Vc与芦丁为阳性对照,SOD、CAT、GSH-Px活性,MDA含量为测定指标,试验显示:壶瓶碎米荠两种粗黄酮均能提高小鼠SOD、CAT、GSH-Px活性,降低MDA含量并呈现出良好的线性效果。试验中含硒粗黄酮抗氧化效果显著高于普通粗黄酮,与阳性对照Vc效果相似。当试验剂量达到100 mg/kg时,芦丁试验组、粗黄酮试验组小鼠体重降低,出现轻微毒害作用,而含硒粗黄酮处理组体重差异不显著,从侧面说明硒具有一定增强免疫力的效果。4.以不同浓度的壶瓶碎米荠含硒粗黄酮与壶瓶碎米荠普通粗黄酮分别作用于小鼠黑色素瘤细胞株B16、人体肺癌细胞株A549,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的抑制作用。试验中黄酮浓度对细胞的增殖抑制有显著影响,一定范围内黄酮浓度越大其抑制率也越大。反应时间对癌细胞增殖具有一定的影响,整体来看试验中在12 h到24 h内随着时间的增加,癌细胞的抑制率显著增加;当24 h后对癌细胞的抑制率部分试验组影响不显著,甚至有下降趋势,说明此时对癌细胞的抑制效果已经达到最大程度,之后随着时间的增加,癌细胞的增殖率逐渐增加;对比含硒黄酮和普通黄酮可知,硒可以增加黄酮对癌细胞的抑制效果,且使作用时间延长。