第一部分 miR-512-3p非小细胞肺癌中的功能研究　　肺癌是世界上死亡率最高的癌症之一。肺癌分为小细胞肺癌(small lungcancer, SCLC)与非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)两大类。其中非小细胞肺癌在肺癌中所占比例约为80％，最常见的非小细胞肺癌类型是肺腺癌、肺鳞癌和肺大细胞癌三个亚型。　　MicroRNA(miRNA)是非编码小RNA，一般长度是18～25nt。MicroRNA与其靶mRNA通过完全或不完全碱基互补配对进行结合，从而导致靶mRNA降解或抑制其蛋白质的翻译。近年来的研究表明，miRNAs在众多生物过程中发挥作用，包括细胞增殖，迁移，凋亡，分化以及EMT等。microRNAs的异常表达与肿瘤的关系非常密切，已有报道称microRNAs常作为原癌基因或者肿瘤抑制基因起作用。而microRNA对于肺癌的发生发展、诊断、治疗和预后方面均发挥了重要作用。　　在本研究中，我们研究了miR-512-3p在非小细胞肺癌细胞中的作用及其调控机制。我们首先利用microRNA表达谱芯片研究了RA刺激非小细胞肺癌细胞系A549的microRNAs表达变化，发现相比于对照细胞，许多microRNAs在受到RA处理之后表达改变，其中miR-512-3p的表达量升高。为了排除芯片结果的假阳性，我们利用实时定量PCR检测了RA处理的A549，H1299细胞中的miR-512-3p的表达量，发现RA刺激诱导miR-512-3p的高表达，这与芯片结果一致。随后我们研究了miR-512-3p在非小细胞肺癌细胞中的作用。在非小细胞肺癌细胞中通过瞬时转染miR-512-3p，我们发现过表达miR-512-3p降低了细胞粘附的能力，抑制了细胞的迁移和侵袭，但是对细胞增殖速率没有显著的影响。另外，我们挑选了稳定过表达miR-512的H1299细胞株，该细胞株的粘附、迁移和侵袭能力与对照细胞相比均有所下降，细胞的锚定非依赖性生长能力也下降。而在稳定过表达miR-512的H1299细胞株中转染miR-512-3p的抑制剂miR-512-3p inhibitor使得细胞的粘附、迁移和侵袭能力都有显著提高，这表明miR-512-3p对细胞粘附、迁移和侵袭的抑制效应可以被miR-512-3p inhibitor所逆转。　　为了研究miR-512-3p家族在NSCLC中的调控机制，利用生物信息学方法，我们预测了miR-512-3p的靶基因，发现DOCK3是一个潜在的靶基因。利用双荧光检测和western blot，我们证明了DOCK3是miR-512-3p的一个靶基因。利用RNA干扰技术，我们发现在A549、H1299细胞中用DOCK3 siRNA敲减DOCK3的表达抑制了细胞的粘附，迁移和侵袭能力，这与DOCK3受到miR-512-3p的负调控之后的作用一致。此外，DOCK3的siRNA可以逆转miR-512-3p inhibitor在稳定过表达miR-512的H1299细胞株中对于细胞粘附、迁移和侵袭的作用。以上实验结果暗示了miR-512-3p抑制细胞的粘附，迁移和侵袭的作用可能依赖于其对DOCK3的调控。　　综上，我们证明了在NSCLC细胞中，miR-512-3p能够抑制细胞粘附，迁移和侵袭;DOCK3是miR-512-3p的一个靶基因，miR-512-3p在NSCLC中的上述作用是通过负调控DOCK3的表达而实现的。　　第二部分 AXL在肺腺癌癌旁中表达高于癌组织　　肿瘤微环境在肿瘤的发展和治疗中都起着重要作用。癌旁细胞中的分子表达水平也被报道与肿瘤的预后有关。AXL是酪氨酸激酶受体家族的一员。在肺腺癌细胞系中，有研究表明AXL在肺腺癌细胞系中能增加细胞的侵袭能力。然而，并没有研究表明肺腺癌和正常组织中AXL表达程度的差异。我们进行了一项基于21套肺腺癌组织基因芯片表达谱的再分析研究，包含了1060例肺腺癌组织及正常组织（或癌旁组织）。数据表明，在肺腺癌癌旁组织中，AXL的表达量显著高于肺腺癌组织(Z=-7.21，P＜0.0001)，而在正常组织中，AXL的表达量与肺腺癌中相比，并没有显著差异(Z=-1.62，P=0.106)。组织芯片水平的研究表明，与癌旁组织相比，肺腺癌组织中AXL蛋白量显著降低(P=0.003);同时，IB期肺腺癌中AXL的表达量也比癌旁组织低(P=0.028)，这可能是小样本量导致的。我们的研究表明AXL的表达在癌旁组织中显著高于肺腺癌中的表达。AXL在肺腺癌癌旁组织中高表达的意义还有待进一步研究。