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本文采用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE),从斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)下丘脑总RNA中进行扩增,得到斜带石斑鱼sbGnRHcDNA全序列。该cDNA全长408bp,编码区285bp,所编码的前体sbGnRH蛋白为94个氨基酸,包括22个氨基酸的信号肽、sbGnRH成熟十肽、加工位点(Gly-Lys-Arg)和GnRH联合肽(GnRH-associatedpeptide,GAP)。同源性分析表明,斜带石斑鱼sbGuRH与舌齿鲈(Dicentrarchuslabrax)sbGnRH同源性为72.3%,与鲻鱼(Mugilcephalus)sbGnRH同源性为71.7%。进化树分析表明,斜带石斑鱼sbGnRH与鲈形目的狼鲈科(条纹狼鲈和舌齿鲈)、鲷科(金头鲷和真鲷)、石首鱼科(波纹绒须石首鱼和红拟石首鱼)鱼类sbGnRH在同一进化支上的不同分支,与鲷科的金头鲷和真鲷亲缘性最近。采用两步法RT-PCR结合Southernblot分析对sbGnRH在斜带石斑鱼成体各组织、胚胎发育和幼体发育早期的表达情况进行了初步的研究。为了更好地了解GnRH在斜带石斑鱼中的生理功能,我们利用PCR方法从斜带石斑鱼垂体总RNA克隆了GnRH受体(GnRHR)的cDNA全长序列。为了获取GnRHR抗体,通过免疫组织化学方法来检测斜带石斑鱼GnRHR蛋白在体内的表达分布水平情况,将斜带石斑鱼GnRHR的开放读码框(ORF)克隆于表达载体pET-22b。重组表达载体经NdeI和XhoI双酶切鉴定,能得到与PCR产物大小一致的片段及载体pET-22b大小一致的片段,表明重组表达载体gGnRHR-pET-22b已经成功构建。随后的GnRHR原核表达还有待进一步研究。