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目的：柯萨奇病毒A组16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71)是手足口病(HFMD)的两个主要致病原。目前的研究发现,HFMD爆发时,CA16和EV71常常交替或共同流行。然而,由于CA16反复感染以及与其他肠病毒的交叉反应性,使得CA16体液免疫反应复杂,CA16体液免疫反应特点尚不明确。本实验构建CA16VP1全长及各截短抗原,利用NEIBM的ELISE方法,研究柯萨奇病毒A组16型体液免疫反应特点。方法：构建pET21b-CA16VP11-297aa(全长)、pET32a-CA16VP141-297aa/pPEPTIDE2-CA16VP11-60aa、 pPEPTIDE2-CA16VP145-58aa和pET32a-CA16VP161-297aa原核表达质粒,转入大肠杆菌经IPTG表达,Ni亲和柱层析纯化上述重组蛋白,ELISA鉴定CA16VP1全长重组蛋白,用NEIBM间接ELISA方法检测95份太原市老年人群(平均年龄：61.0±14.0岁)及142份上海市献血员人群(平均年龄：35.5±11.2岁)的血清抗CA16VP1的抗体情况,并进行竞争ELISA分析。结果：1.成功构建了5种CA16VP1全长及截断重组质粒并在大肠杆菌中表达,获得了5种VPl全长及截断重组蛋白,其中pPEPTIDE2-CA16VP11-60, pPEPTIDE2-CA16VP145-58以可溶性蛋白形式存在,pET32a-CA16VP161-297, pET32a-CA16VP141-297, pET21b-CA16VP11-297以包涵体的形式存在。2. NEIBM间接ELISA检测结果显示：太原市老年人群血清与CA16VP11-297、CA16VP141-297. CA16VP11-60. CA16VP145-58和CA16VP161-297抗原反应的阳性率分别为76.84%、40.00%、33.68%、31.57%和30.53%；上海市献血员人群血清抗-CA16VP11-297的阳性率为59.15%。3.对46份太原市老年人抗-CA16VPl1-297强反应血清的竞争ELISA结果显示：CA16VP11-297、CA16VP141-297、 CA16VP11-60、 CA16VP145-58和CA16VP161-297抗原的抑制率中位数分别为73.50%、53.75%、21.00%、20.50%和15.50%。对84份上海市献血员抗CA16VP11-297强反应血清的竞争ELISA结果显示：CA16VP11-297、 CA16VP141-297、 CA16VP11-60、 CA16VP145-58和CA16VP161-297抗原的抑制率中位数分别为86.00%、86.00%、82.50%、62.00%和28.50%。4.太原老年人血清和上海献血员血清与CA16VPl全长及各截短蛋白的竞争模式及构成比明显不同。结论：1.太原老年人群及上海献血员人群中有较高的CA16和/或CA16相关抗体。2CA16VPl全长及各截短抗原对太原老年人群和上海献血员人群中抗-CA16VP1检测的抑制情况明显不同,提示这两类人群感染了不同的CA16和/或CA16相关病毒。3.人体抗CA16抗体反应主要针对以交叉表位为主的抗原。