选育高产Monacolin K红曲菌及深层发酵的研究

来源 :浙江工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luoyuqingyuan
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就收集的红曲菌株进行筛选,得到一株Monacolin K产量相对最高的红色红曲NMonascus ruber GM011,其产量为258.2mg/L。以此菌株为原始出发菌株,孢子通过紫外、LiCl、紫外-LiCl复合诱变、亚硝酸处理和硫酸二乙酯诱变,得到桔霉素含量较小的Monacolin K产量较高的突变株W283,其Monacolin K产量为395.3mg/L,较出发菌株提高了53.1%,传代性实验表明该菌株产量较稳定。实验发现适量添加乙酸可明显促进红曲发酵液中Monacolin K的产量。未添加乙酸的发酵液中Monacolin K含量为390.3mg/L,添加乙酸后发酵液中Monacolin K含量提高到971.8 mg/L,提高了149.0%;而随着乙酸添加量的进一步增加,红曲产Monacolin K的能力反而有所下降;乙酸乙酯、乙醇及正己烷也会影响红曲产Monacolin K的能力;培养基中适量添加MgSO4、ZnSO4对红曲产Monacolin K有一定的促进作用,但随着添加量的进一步增加,反而抑制了红曲产Monacolin K的能力,尤其是ZnSO4,当添加量达到4g/L时,发酵液中菌丝体的生长明显减弱;外界环境中较高的渗透压,可能会刺激红曲细胞合成大量的Monacolin K来应对这种高渗环境。添加某些具有降血糖功效的常见食品于红曲液体培养基中,发现培养基中添加薏米仁,可明显促进红曲产Monacolin K的能力,产量可达917.7 mg/L,增加了135.61%。通过单因素实验,Plackett-Burman设计以及响应面法,得到W283产Monacolin K的最优发酵条件(g/L):葡萄糖20,蛋白胨16.3,甘油95.7,MgSO4 1,NaNO3 6.8,ZnSO4 2,KH2PO4 1,薏米仁2.5,KNO35,pH4.4,接种量8%。按照此发酵条件培养,Monacolin K产量可达到1290mg/L,是未优化前的3.3倍,出发菌株的5倍。
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