肿瘤靶向荧光成像及基因治疗一体化碳点研究

来源 :大连理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackyray
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
开发了一种新型的集肿瘤靶向识别及基因传递功能一体的递送系统用于肿瘤的诊断及治疗。碳量子点(CDs)为载体的核心部分,使其具有荧光成像的作用,键合正电荷密度较高的枝状聚乙烯亚胺(bPEI,1000Da),可紧密结合DNA并可通过“质子海绵作用”促进内涵体逃逸;通过细胞膜表面的免疫逃逸蛋白和同源靶向蛋白作用为纳米粒子提供靶向性。1.CDs及其PEI修饰载体的合成和表征通过微波合成法将尿素和柠檬酸以2:1的比例合成CDs,利用TEM对其形貌进行表征,结果显示CDs粒径在5 nm左右,且分散均匀;FTIR结果表明CDs富含羧基(-COOH);紫外最大吸收波长为411 nm,荧光光谱显示在460 nm激发下最大发射波长为535 nm。CDs与可有效压缩DNA的bPEI发生酰化反应,使CDs-PEI表面带有正电荷,TEM结果显示CDs-PEI粒径约为10 nm,FTIR结果显示出现酰胺键(-CO-NH-)和氨基(-NH2),表明PEI成功键合在CDs上。DLS结果显示CDs键合PEI后电位由-16.5 mV升高至24 mV。CDs-PEI紫外最大吸收波长为335 nm,荧光光谱显示在370 nm激发下最大发射波长为456 nm。缓冲能力测试表明,CDs-PEI具有良好质子缓冲能力。2.CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M复合物的性能研究粒径及ζ-电位分析结果显示不同载体与pDNA重量比(N/P)的CDs-PEI/pDNA复合物粒径在200-500 nm之间;ζ-电位在4-30 mV之间。在包覆Hep-G2的细胞膜之后,CDs-PEI/pDNA/M复合物粒径在130-450 nm之间;ζ-电位在-20-17 mV之间。凝胶阻滞实验证明载体CDs-PEI和CDs-PEI/M在体外可以通过静电作用结合pDNA,并能有效保护pDNA不被DNase I及血清降解,以实现基因的顺利递送。MTT结果显示由于细胞膜屏蔽了表面部分正电荷,CDs-PEI/M的细胞毒性与PEI及CDs-PEI相比明显降低。体外转染实验结果表明,CDs-PEI/pDsRed2-N1和CDs-PEI/pDsRed2-N1/M均在N/P比为12.8时达到最高的转染效率。载体运载抑癌基因p53及TRAIL的细胞凋亡实验结果显示,CDs-PEI/p53及CDs-PEI/TRAIL诱导凋亡的效率分别高于Lipofectamine 2000/p53和Lipofectamine 2000/TRAIL。3.CDs-PEI/pDNA/M复合物的靶向性能研究MCF-7、Hela和Hep-G2三种细胞株对于包覆三种不同细胞膜的CDs-PEI摄取实验结果表明,细胞对于有同源细胞膜包覆的纳米粒子呈现最高的摄取量。体外转染实验结果表明,对于分别有MCF-7、Hela和Hep-G2细胞膜包覆的CDs-PEI/pDsRed2-N1/M体系,在同源细胞中的转染效率呈现最高水平。载体运载抑癌基因p53及TRAIL的细胞凋亡实验证明,有同源细胞膜包覆的体系诱导自身细胞凋亡的效率最高。
其他文献
本文主要对我国高校的体育课程模式现状进行分析。众所周知,体育课程模式是体育课程目标与体育教学实践之间的桥梁,体育课程模式应该区别于体育教学模式。社会的发展深刻地影
对芝麻湿法脱皮和芝麻仁热风干燥工艺进行研究.以脱皮率、亮度和黄色值的综合评分为指标,通过单因素和正交试验,确定芝麻湿法脱皮最佳工艺条件为:碱液质量浓度0.9 g/mL,浸泡温
中式英语是规范英语在中国的误用,并普遍存在于中国英语学习者当中。作为一种介于汉语和英语之间的中介语,中式英语既有英语的雏形或框架结构,同时又带有母语汉语中不合英语
本文对小规模肉牛养殖的现状进行分析,并促进其发展的策略加以探讨.
简单介绍了采用环氧树脂的水下涂料的发展历史,目前常用的固化剂类型,以及水下环氧涂料在使用中需要注意的问题.
<正> 随着高层建筑的不断发展和抗震需要,圈梁模板的需用量逐年增加。目前,定型组合式钢模板的多采用以下规格:宽100毫米、150毫米、200毫米、300毫米,长450毫米、600毫米、7
通过这次学习,我感到经受了一次马克思主义理论的洗礼,对习近平新时代中国特色社会主义思想和党的十九大精神有了新的、更深刻的理解和认识,对中国铁路总公司党组的战略部署以及
报纸
小龙虾耐受性强,繁殖快,常栖息于富含腐殖质较多的泥质地区,如河流、湖泊、水库、池塘、沼泽及沟渠中。小龙虾耐受能力比较强主要是因为小龙虾对水质的要求较宽。$$pH值:小龙
报纸
目的 探讨股骨颈骨折行髋关节置换术后康复治疗对患者骶髂关节功能的改善情况。方法 选择因股骨颈骨折行髋关节置换术的患者,分为康复治疗组和常规处理组,每组各55例。髋关节
文章主要介绍非接触式液位检测控制系统在工业液位检测中的应用及实现,由于非接触式液位传感器使用光电式传感器,因此,介绍了光电式传感器在工业液位检测中的设计和应用及制