目的:研究流体剪切力(Fluid shear stress,FSS)通过调控RAW264.7细胞中的细胞外信号调节激酶5(extracellular-regulated kinase 5,ERK5)信号通路对其向破骨细胞分化及骨吸收功能的影响。方法:设置时间梯度对RAW264.7细胞加载0、15、30、45、60、90min的FSS,通过Western blot检测FSS对ERK5的作用及最佳作用时间,并验证XMD8-92对ERK5磷酸化的抑制作用;然后将实验分组为空白对照组、RANKL组、FSS组及FSS+RANKL组,处理4天后观察并检测破骨细胞分化、骨吸收功能及TRAP酶活性;通过使用CCK-8测定法检测细胞活力;使用Western blot法检测并分析磷酸化ERK5(p-ERK5)、NFATc1、CTSK、TRAP、MMP-9蛋白的表达。结果:Western blot检测显示RANKL对ERK5均无明显磷酸化激活作用,但加载FSS 30min对ERK5有显著激活作用,XMD8-92可特异性抑制FSS激活的ERK5磷酸化;细胞计数、TRAP酶活性及骨吸收实验显示,与RANKL组相比,FSS组的TRAP阳性多核细胞显着减少,TRAP酶活性也显著降低,且FSS+RANKL组的结果显示FSS对RANKL激活的破骨细胞分化有明显的抑制作用,同时CCK-8检测显示FSS对RAW264.7细胞并无毒性作用,不会影响细胞活力,通过Western blot法检测显示,对比空白组或RANKL组,FSS组的NFATc1,CTSK,TRAP和MMP-9的表达显著降低,并且FSS会抑制RANKL对这些蛋白的激活作用;XMD8-92在所有亚组中均可抑制ERK5的磷酸化,同时发现添加XMD8-92显着逆转了FSS对RANKL激活NFATc1的抑制作用,并增加了NFATc1和破骨细胞分化特异性蛋白CTSK,MMP9和TRAP的表达。结论:FSS通过激活ERK5信号通路抑制NFATc1及其下游因子MMP9,CTSK和TRAP的表达,进而影响RAW264.7细胞的破骨细胞分化及骨吸收功能。