神经生长因子-beta对猪卵母细胞体外发育的影响

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神经生长因子与神经细胞生长,存活息息相关。近几年来的研究发现在生殖轴上NGF及其受体也有分布,并且通过差异的表达分布影响着动物的生殖生理;卵丘细胞在卵母细胞的成熟、受精能力和胚胎后期发育中也起着极为重要的作用。本论文中,以NGF与裸卵为主线展开,希望能够发现这两个因子对卵母细胞的影响。1、不同包裹状态的COCs得到的裸卵培养,观察成熟,结果:A级COCs得到的裸卵在成熟率(41.52%)上最高,与C级卵(18.23%)、未分级卵(26.13%)差异显著。2、使用A级卵丘卵母细胞复合体得到的裸卵,体外添加NGF,结果:对成熟和退化没有影响,卵裂率上10ng/mL NGF(50.68%)组最高,与对照组(25.96%)、100ng/mLNGF(29.31%)组差异显著;囊胚率都很低。使用自然裸卵和C级卵形成的Dos重复,得到相同结果结果,但是卵裂率没有达到差异显著,有可能是实验误差和卵母细胞质量本身就低造成的。3、在猪的卵母细胞成熟液添加不同浓度(1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL)的NGF,观察卵母细胞的成熟、退化、卵丘扩散程度,以及孤雌后,孤雌胚胎的发育情况。结果:在成熟率上,添加10ng/mLNGF组的虽然提高了成熟率,但是没有达到差异显著;成熟的卵母细胞在卵丘扩散上表现为100ng/mLNGF组最低并与对照组、10ng/mLNGF组差异显著;在退化率上,10ng/mLNGF组最低,并与100ng/mLNGF组差异显著(16.07%vs23.61%)。孤雌胚胎的发育则表现为:10ng/mLNGF组在卵裂率、囊胚率和囊胚总细胞数上最高,并且与100ng/mLNGF组在卵裂上差异显著(67.95%vs48.41%),与对照组在囊胚率上差异显著(42.31%vs19.03%)。4、为了更精确探究NGF对COCs的作用时间,我们将成熟时间分为前21小时和后21小时,分别在这两个时间段添加不同浓度的NGF(1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),结果:前21小时添加NGF的各组,对卵母细胞的影响均没有体现;后21小时添加的表现为:10ng/mL NGF组提高了成熟率,降低了退化率,但是没有达到差异显著,卵裂率还是以10ng/mL NGF组(75.72%)最高,并与100ng/mLNGF组(54.32%)表现为差异显著,囊胚率10ng/mL NGF组最高,但差异不显著。5、在猪的胚胎培养液中添加不同浓度(1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL)的NGF,结果:对孤雌胚胎的发育没有影响。
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