染氟成骨细胞蛋白质组学初步分析

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成骨细胞功能活跃在氟骨症病变中是一个发生较早、并起主导作用的环节。开展氟中毒蛋白质组研究,定量地观察氟中毒发生发展过程中蛋白质种类、数量的改变,探讨在过量氟作用下成骨细胞是怎样被激活。本实验复制氟骨症模型和体外培养小鼠成骨细胞染氟,观察不同剂量氟对成骨细胞增殖活性的影响,及成骨细胞蛋白质组学变化,并利用RT-PCR方法对蛋白组学结果进一步验证分析。本实验结果表明低钙饮食加上饮用高氟水进一步加重氟促骨相组织氧化应激反应。低水平氟(0.5-2.0 mgF~-/L)均能够明显刺激细胞增生:而随着染氟时间的延长,高水平氟(≥12 mgF~-/L)则对成骨细胞的增殖起到抑制作用。应用双向电泳和图谱分析显示出染氟2.0 mgF~-/L细胞与功能活跃,代谢旺盛相关的蛋白表达明显增加。染氟成骨细胞内HSP70、PDI和TRX在基因和蛋白质水平上表达明显增多,借此细胞内氧化应激与成骨细胞增殖之间建立起的分子联系。低剂量氟所致成骨细胞活跃增生与氧化应激同时出现,提示程度较轻的氧化应激主要不是造成细胞损害,而可能参与细胞增生、活化的信号转导与调控。
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