人工栽培鸡血藤总黄酮积累的研究

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鸡血藤作为我国重要的传统中药材,药用成分较为复杂,黄酮类是其主要成分之一。植物体内黄酮类化合物含量受多种因素的影响,培养条件中矿质元素、诱导子、生长调节剂、前体物质等都可能影响黄酮类化合物的合成。本论文来源于国家林业公益性行业科研专项项目“仙茅、鸡血藤资源培育及林下种植技术研究(201304807)”。本文以密花豆鸡血藤(Spatholobus suberectus)为材料,采用田间小区试验设计,分别研究了不同苯丙氨酸、氯化镧、锌硼配施、氮磷钾配施、地衣芽孢杆菌生物菌剂处理对四年生鸡血藤主要药用成分总黄酮含量在叶中的年动态变化,并通过同步测定叶中可溶性蛋白质含量、次生代谢关键酶PAL酶活性,从终产物水平初步探索了鸡血藤品质对不同施肥处理的响应机制,获得适宜鸡血藤有效药物成分积累的施肥水平,可作为实际生产中鸡血藤施肥时的参考。具体结论如下:  1、适量苯丙氨酸处理能促进鸡血藤总黄酮含量的积累。鸡血藤叶总黄酮含量、可溶性蛋白质含量和PAL酶活性年动态变化均呈双峰曲线,总黄酮含量与鸡血藤叶PAL酶活性变化趋势基本相似,而与可溶性蛋白质含量变化趋势相反。P100(100mg/L)条件下鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性较对照间显著增高(P<0.05),可溶性蛋白质含量在P100条件下处于较低水平,且与其它处理间达显著差异(P<0.05)。  2、通过对不同LaCl3溶液处理下鸡血藤叶总黄酮含量、可溶性蛋白质含量和PAL酶活性进行研究,结果表明,鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性在整个生长观测期内变化趋势基本相似。X50(50mg/L)水平下,LaCl3对鸡血藤叶中总黄酮和PAL酶活性影响基本不大;X250(250mg/L)条件下鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性最高,且与CK存在显著差异(P<0.05);随着喷施量的逐步提高,鸡血藤叶中总黄酮含量和PAL酶活性会大幅度降低。  3、通过研究不同Zn、B配施对鸡血藤叶总黄酮含量、可溶性蛋白质含量和PAL酶活性的影响,结果表明,低施肥水平下,Zn、B配施对鸡血藤叶总黄酮含量、可溶性蛋白质含量和PAL酶活性影响基本不大;F处理下,即喷施25 mg·L-1 ZnSO4+50 mg·L-1 Na2B4O7·10H2O,对三者促进作用明显;当喷施量大于F处理时,随着施用量的逐步提高,鸡血藤叶总黄酮含量、可溶性蛋白质含量和PAL酶活性逐渐降低。同时,鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性在整个生长观测期内变化趋势基本相似。  4、研究不同氮磷钾配比对鸡血藤叶总黄酮含量、可溶性蛋白质含量和PAL酶活性的影响,结果表明,N2P4K4和N1P3K3处理的鸡血藤叶总黄酮含量在整个生长进程中达到最高和次之,均与空白对照间差异显著(P<0.05),且两者间差异显著(P<0.05);N2P4K4处理的鸡血藤叶可溶性蛋白质含量最高,但较对照组差异不显著(P>0.05);N2P4K4处理的鸡血藤叶PAL酶活性较对照组显著增高(P<0.05),且与其余处理间达显著差异(P<0.05)。同时,鸡血藤叶总黄酮含量同可溶性蛋白质含量和PAL酶活性间呈极显著正相关。  5、各地衣芽孢杆菌生物菌剂处理能够有效促进鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性,而对可溶性蛋白质含量的影响基本上不显著。各地衣芽孢杆菌生物菌剂处理的鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性在整个生长观测期内变化趋势基本相似。低处理水平下,鸡血藤叶总黄酮和PAL酶活性影响较对照组差异性不显著(p>0.05);D20(20g株-1)条件下鸡血藤叶总黄酮含量和PAL酶活性较对照组显著增高(p<0.05);当施用量继续增大时,鸡血藤叶中总黄酮含量和PAL酶活性均明显降低。
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