论文部分内容阅读
目的:探讨川芎嗪对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞表达IL-8的影响。方法:川芎嗪预处理细胞后,用脂多糖刺激细胞,采用RT-PCR,ELISA,Western blot以及免疫荧光的方法检测川芎嗪对脂多糖诱导细胞表达IL-8的影响,并探讨相关机制,以及药物干预脂多糖对趋化单核细胞向内皮细胞聚集的影响。结果:川芎嗪抑制脂多糖诱导的细胞中ERK,P38的磷酸化和NF-κB的核转位,减弱IL-8 mRNA, IL-8蛋白在细胞中的表达。用P38磷酸化的抑制剂SB203580 (25μM)可以阻断脂多糖诱导的IL-8的合成以及对NF-κB的激活。此外,脂多糖诱导的IL-8的表达也可被PD98059 (30μM)(ERK磷酸化抑制剂)所抑制。川芎嗪也可以抑制脂多糖诱导的U937单核细胞向内皮组织的聚集。结论:川芎嗪可能通过阻断ERK、P38、NF-κB通路来抑制脂多糖诱导的IL-8的合成,川芎嗪抑制单核细胞向内皮组织的聚集可能是通过抑制趋化因子的产生达到的。因此,川芎嗪在治疗心血管疾病方面展现出良好的应用前景。第二部分川芎嗪对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞表达IL-6的影响目的:探讨川芎嗪对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞IL-6表达的影响和相关机制。方法:细胞在川芎嗪预处理后与脂多糖孵育,采用RT-PCR,Western blot, ELISA的方法检测川芎嗪对IL-6表达的影响及具体的调控机制。结果:川芎嗪有效的抑制了IL-6蛋白和mRNA的表达。川芎嗪对P38、ERK、PI3K/AKT激酶磷酸化的抑制作用也可以抑制脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞IL-6蛋白的表达。川芎嗪还通过降解IκBα作用拮抗脂多糖诱导的NF-κB的核转位。LY294002(PI3K的抑制剂)可以抑制IκBα的降解,说明PI3K/AKT是NF-κB上游因子。此外,脂多糖诱导的AKT的磷酸化可被P38抑制剂SB203580抑制。表明P38可能位于PI3K/AKT通路的上游,两者共同调控脂多糖诱导的IL-6的表达。结论:川芎嗪可能在治疗心血管疾病如动脉粥样硬化方面起着重要的作用。