目的:在神经系统疾病的治疗中,神经前体细胞具有非常可观的应用前景,其具有分化为多种类型的神经细胞的能力,但是内源性神经前体细胞的数量较少,不能满足中枢神经系统损伤的需要。因此本课题确定了一种研究方法,探讨大鼠成纤维细胞（REFs）在低氧条件下（5%O2）重编程为神经前体细胞（ci RNPCs）的方法体系,研究定向移植REFs-ciRNPCs改善帕金森大鼠运动功能的修复效应。方法:REFs重编程为ci RNPCs经历了两个阶段,第一阶段是化学诱导中间态细胞的产生,REFs在5%O2的低氧条件下采用含有VCR小分子化合物（VPA,CHIR99021,Repsox）和10000U/m L LIF的KSR培养基培养15天,即可观察到致密细胞集落即中间态细胞形成。第二阶段是特异性诱导ci RNPCs,0.25%胰蛋白酶-EDTA消化中间态细胞,接种低黏附板,NEM培养基常氧条件下悬浮培养,第2天形成ci RNPCs神经球。通过免疫荧光染色和Western Blot鉴定其神经相关标志物表达情况,对各个阶段的细胞进行转录组和基因组测序分析。通过脑立体定位仪,采用6-OHDA两点右侧内侧前脑束注射法制备偏侧损毁的帕金森大鼠模型。2周后,阿扑吗啡（APO）诱导旋转试验筛选建模成功的帕金森大鼠模型。用红色染料CM-Di I标记ci RNPCs后,将ci RNPCs定向至移植帕金森大鼠脑黑质,通过APO诱导旋转实验、旷场实验、疲劳转棒实验和水迷宫实验,比较空白组、模型组和移植组大鼠的运动协调能力。移植细胞8周后,各组大鼠取脑进行HE染色,观察损伤部位的细胞数量及形态变化情况;免疫组化法检测各组酪氨酸羟化酶（TH）的表达。细胞移植后8周、26周,免疫荧光法观察移植后的ci RNPCs在宿主脑内的存活、迁移及分化状况。结果:低氧诱导5-10天时已观察到明显细胞聚集趋势,15天已形成聚集紧密的克隆,1×105个细胞中大约产生30个克隆,同时大部分细胞AP染色阳性,消化重铺后2天即可观察到有神经胚球形成,并可表达NPCs表面特征性抗原（Nestin、Sox2和Pax6）,并具有向神经胶质细胞和神经元分化的能力,分别表达GFAP和Tuj1特异性标志物。与模型组相比,移植组大鼠的APO诱导旋转实验、旷场实验、疲劳转棒实验和水迷宫实验存在显著性差异（p＜0.01）,这表明移植细胞后的帕金森大鼠运动功能显著改善。细胞移植8周后,HE染色结果表明,与对照组相比,模型组大鼠的损伤区域的细胞量显著减少,且排列紊乱。移植组大鼠的细胞量较模型组增多且细胞排列较规则。TH免疫组化结果显示,模型组大鼠损伤区域的TH表达量较对照组显著减少,而移植组大鼠的TH表达量相较模型组显著增多。细胞移植后26周,观察免疫荧光结果,可见CM-Di I阳性的细胞,同时也表达神经元标志物β-Ⅲ-tubulin、多巴胺能神经元标志物TH、GABA能神经元标志物GABA、兴奋性突触后膜标志物GAD67、突触前膜标志物Synapsin、突触后膜标志物PSD95及星型胶质细胞标志物GFAP。结论:1、本研究通过两个阶段,在小分子化合物VCR组合低氧条件下可直接诱导大鼠成纤维细胞重编为神经前体细胞,为神经前体细胞移植治疗神经损伤疾病奠定基础。2、移植的ci RNPCs在帕金森大鼠脑微环境中可至少存活26周,同时发生远距离迁移,并且分化为不同的功能性神经元,与自体神经元产生突触连接并发挥作用。