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神经母细胞瘤(Neuroblastoma，NB)是婴幼儿最为常见的恶性肿瘤，以其发病率和死亡率高、预后差、有家族倾向性等特点被称为“儿童癌症之王”。蜂斗菜作为一种植物药，在欧洲已经有几百年的应用历史，经临床实验证实，其在治疗偏头疼、过敏性鼻炎、哮喘、泌尿生殖道痉挛等方面，疗效可靠，不良反应少。研究发现蜂斗菜素(petasin)作为一种来源天然的植物提取物，具有明显的抗人神经母细胞瘤作用。本研究中我们以两种人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞和SH-SY5Y细胞为实验对象，探讨蜂斗菜素抗神经母细胞瘤细胞的作用机制，以期为将其开发用于预防和治疗神经母细胞瘤提供实验依据。
本研究首先就蜂斗菜素对SK-N-SH和SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用进行了初步的比较研究。结果发现蜂斗菜素对SK-N-SH和SH-SY5Y细胞均具有不同程度的增殖抑制作用，且呈现明显的时间和浓度依赖性，尤其是对SK-N-SH细胞的增殖抑制作用相对化学治疗药顺铂较强（蜂斗菜素和顺铂作用72h后的IC50分别为0.8μmol·L-1和3μmol·L-1）。
为进一步探索其作用机制，我们观察了蜂斗菜素对SK-N-SH和SH-SY5Y细胞增殖周期和凋亡的影响，并对MAPK蛋白通路等方面做了深入研究。流式细胞仪检测细胞周期，结果发现蜂斗菜素作用48h后，能将SK-N-SH细胞周期阻滞于G1/G0期;将SH-SY5Y细胞周期阻滞于S期。流式细胞仪和Hoechst33342/PI双染色法检测蜂斗菜素对细胞凋亡的影响，采用顺铂作为诱导SK-N-SH和SH-SY5Y细胞凋亡的阳性对照药物，结果显示蜂斗菜素能明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡，而不能诱导SK-N-SH细胞产生凋亡;在荧光显微镜视野中，SK-N-SH细胞核保持完整，呈现微弱蓝色荧光，而SH-SY5Y细胞核均出现破裂，呈现明亮蓝色荧光，高浓度的蜂斗菜素作用SK-N-SH细胞后，出现明亮的红色荧光，说明细胞均已坏死。蛋白免疫印记法（westernblotting）检测蜂斗菜素作用后SK-N-SH和SH-SY5Y细胞中ERK1/2、MEK和p38蛋白磷酸化表达情况。结果发现，蜂斗菜素能瞬时上调SK-N-SH和SH-SY5Y细胞的ERK1/2和MEK蛋白磷酸化水平，且呈现一定的浓度依赖性，12h后又会恢复至正常水平;同时蜂斗菜素作用后，SK-N-SH细胞的p38蛋白磷酸化水平没有明显变化，而SH-SY5Y细胞的p38蛋白磷酸化水平明显上调。
综上所述，蜂斗菜素对人神经母细胞瘤SK-N-SH和SH-SY5Y两种细胞株均有明显的增殖抑制作用，但作用机制并不相同。在SK-N-SH细胞中，蜂斗菜素主要通过阻滞其细胞周期和影响ERK信号通路及ERK上游相关信号，发挥细胞的增殖抑制作用;而在SH-SY5Y细胞中，蜂斗菜紊可能是触发了SH-SY5Y细胞的p38相关信号通路，诱导SH-SY5Y细胞产生凋亡从而实现增殖抑制作用。