一株腐败希瓦氏菌对活性艳红X-3B和活性艳蓝KN-R的脱色研究

来源 :武汉纺织大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahdx2009
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传统的建立在细菌系统上的染料生物处理技术对非偶氮染料基本不能脱色,对偶氮染料也只能在厌氧条件下脱色。而本研究前期筛选到一株厌氧好氧条件都可对偶氮染料脱色,且可在缺氧条件下对蒽醌染料脱色的腐败希瓦氏菌株4H。本论文主要对菌株4H对典型偶氮染料活性艳红X-3B和典型蒽醌染料活性艳蓝KN-R的脱色特性及机理进行研究,以评价该菌在染料污染治理中的应用潜力。(1)腐败希瓦氏菌株4H对活性艳红X-3B和活性艳蓝KN-R的脱色特性研究结果显示,该菌在含50mg/L染料的LB培养基中37℃、起始pH8、静置培养时,菌体生长及脱色效果均相对最好,对染料的脱色效果与菌体量呈正相关;通气量对菌体生长量与脱色效果影响较大,菌体数量增长与其呈正相关,菌体对两种染料的脱色效果与其呈负相关。(2)腐败希瓦氏菌株4H通过产生胞外酶将活性艳红X-3B降解脱色。通过PCR在该菌中扩增出了偶氮还原酶编码基因,其序列与GenBank中已有腐败希瓦氏菌株偶氮还原酶编码基因相似性均达99%。采用硫酸铵沉淀法提取该菌胞外酶,并利用亲和层析法纯化,得到与偶氮还原酶分子量大小一致的22KDa左右的蛋白。在此过程中,发现该酶在透析后酶活丧失,而外源添加辅酶NADH后酶活恢复。将该胞外酶对10mg/L活性艳红X-3B进行脱色研究,结果显示,起始pH=7、辅酶NADH浓度为2mmol/L、50℃、厌氧处理的效果最好;此外,辅酶FMN的单独添加不影响该酶的活性,但FMN与辅酶NADH同时添加时对该胞外酶酶活具有协同增效作用,其协同增效作用与FMN浓度成正比。(3)腐败希瓦氏菌株4H对活性艳蓝KN-R通过菌体先吸附后降解的方式脱色,其吸附效果受氨基酸、维生素等生长因子的影响显著。已发现8种生长因子能增强菌体对染料的吸附效果,其作用效果从大到小依次为:半胱氨酸>苏氨酸>抗坏血酸(维生素C)>丙氨酸>色氨酸>天门冬酰胺>亮氨酸>谷氨酰胺。本论文研究结果表明,腐败希瓦氏菌株4H在染料生物处理方面具有很好的开发和应用价值。
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