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羊泰勒虫病(Ovine and caprine theileriosis)是媒介蜱传播的由泰勒科泰勒属的原虫寄生于绵羊和山羊巨噬细胞、淋巴细胞和红细胞内所引起的疾病的总称。严重影响了畜牧业的发展。本研究从吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表达文库中克隆出T1SP基因,通过构建原核重组表达质粒,进行诱导表达和纯化,得到重组rT1SP抗原。经Western-blot方法分析证实T1SP表达蛋白的反应性。经过真核转染用激光共聚焦显微技术对其在Vero细胞中表达蛋白进行定位,最后建立检测羊泰勒虫的间接ELISA方法。为今后羊泰勒虫病的免疫学诊断和基因工程疫苗的研究奠定基础。克隆吕氏泰勒虫(Theileria luwenshuni)T1SP基因的功能区片段,以吕氏泰勒虫cDNA表达文库为模板,PCR扩增出T1SP基因片段,构建成pET-30a-T1SP重组质粒,通过诱导表达,获得了可溶性表达蛋白,并对其用镍柱进行亲和层析纯化,得到重组rT1SP抗原,用Western-blot分析了T1SP表达蛋白与尤氏泰勒虫(T. uilenbergi)、绵羊泰勒虫(T. ovis)、以及环形泰勒虫(T. annulata)阳性血清均有交叉反应。证实T1SP同源基因也存在于环形泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫中。为研究吕氏泰勒虫T1SP基因在Vero细胞的表达与定位,构建了pEGFP-N1-TISP重组表达质粒,经脂质体转染Vero细胞后,用Western-blot印迹验证了该蛋白在Vero细胞的表达；用荧光显微镜和激光共聚焦显微成像技术确定了T1SP重组蛋白在真核细胞的分布及亚细胞定位。结果表明重组质粒pEGFP-N1-TISP在Vero细胞中获得了表达,绿色荧光主要聚集于细胞浆,而在空载体pEGFP-N1转染组,绿色荧光弥散性分布于细胞核。T1SP融合基因在外源真核Vero细胞成功进行了表达,表达蛋白主要定位于Vero细胞的细胞浆。以表达的重组rT1SP作为间接ELISA包被的抗原,建立了检测羊泰勒虫抗体的间接ELISA方法。实验用标准的阴性血清为96份,阳性血清为137份,通过MedCalc Software统计该方法的敏感性和特异性,确定cut-off值(阴、阳性的临界值。用该方法验证与巴贝斯虫的抗体有无交叉反应,并检测了我国部分地区羊泰勒虫抗体的高低。研究得出rT1SP抗原的间接ELISA方法cut-off值为19%,特异性达到97.9%,敏感性达到97.1%与羊巴贝斯虫阳性血清无交叉反应。该方法的建立为今后应用田间检测羊泰勒虫建立了血清学方法,也为本病的进一步防控提供相应的研究资料。