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目的:观察美白保湿乳液祛皱配方和美白配方对人角质形成细胞增殖活性的影响;对豚鼠和白色家兔的皮肤刺激反应、免疫反应及白色家兔皮肤的病理变化。方法:1、皮肤变态反应试验:豚鼠背部脱毛后的第2d、第7d和第14d,将美白保湿乳液祛皱配方和美白配方涂在豚鼠背部皮肤保持6h,进行诱导接触,末次诱导后第14d,将美白保湿乳液祛皱配方和美白配方涂在豚鼠背部皮肤保持6h,进行激发接触。激发接触后24h和48h观察豚鼠皮肤的反应以及比较试验前后豚鼠体重的变化。2、皮肤刺激试验:将美白保湿乳液祛皱配方和美白配方涂在脱毛后的白色家兔背部皮肤,保持4h,清除药物后1、24、48和72h观察用药区皮肤反应。之后连续14d每天涂抹一次,每次涂抹前清除残留药物并于1h后观察皮肤反应,实验结束后取用药区皮肤做病理切片,检测真皮和表皮的变化。3、细胞增殖实验:以体外培养的人皮肤表皮细胞(HaCat)为对象,不同浓度美白保湿乳液祛皱配方和美白配方处理细胞后,用MTT实验检测在492nm波长的吸光度(A值),分析美白保湿乳液祛皱配方和美白配方对HaCat细胞增殖活性的影响。结果:1、皮肤变态反应试验:诱导接触后阳性对照组用药区皮肤出现红斑、水肿,阴性对照组和祛皱配方组及美白配方组皮肤无变化。激发接触后阳性对照组用药区皮肤出现明显红斑、焦痂、水肿,致敏率为100%,阴性对照组和祛皱配方组及美白配方组皮肤无变化,致敏率为0。2、急性皮肤刺激试验:清除受试物后1、24、48和72h皮肤无明显红斑、水肿等反应;多次皮肤刺激试验:连续14d每天于清除残留受试物1h后观察皮肤,仅美白配方组有一只出现红斑,无水肿等反应,反应平均分值为0.143。3、组织病理切片检查:美白配方组和祛皱配方组的病理积分均小于4,对皮肤无明显刺激作用。4、不同浓度的美白保湿乳液祛皱配方及美白配方处理细胞后12、24、48 h,阳性对照组细胞数量明显减少,大量细胞坏死、崩解;阴性对照组细胞形态正常,数量明显增加,生长良好;祛皱配方组及美白配方组大部分细胞形态正常,生长良好,个别细胞坏死、崩解。结论:1、不仅从外观上,而且从体重上显示出:美白保湿乳液祛皱配方及美白配方对豚鼠不产生皮肤变态反应,无致敏作用。2、不仅从外观上,而且从组织病理上显示出:美白保湿乳液祛皱配方及美白配方对白色家兔皮肤无明显刺激作用。3、通过检测各孔在492nm波长的吸光度(A值),求出祛皱配方组及美白配方组的IC50分别为2.736mg/ml、2.575 mg/ml。根据欧盟国家实验室化妆品毒性的判定标准,美白保湿乳液祛皱配方及美白配方的细胞毒性极小或无细胞毒性。