依达拉奉联合供心不停跳保存和移植提高猪缺氧无心跳供体(NHBD)心移植效果实验研究

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背景:心脏移植目前已成为治疗终末期心脏病的重要手段。经过各国学者数十年的努力,术后生存率已明显提高,但供心来源的缺乏限制了其进一步的发展。如能利用无心跳供体(NHBD)心脏进行心脏移植将为扩大供心池开辟新的途径。缺氧停跳的供心在NHBD中最有可能利用,但与缺血或其它原因导致的无心跳供心比较,其损伤严重,保护难度大,极具有挑战性,急需寻找更加完好的心肌保护方法。目的:本课题将回答缺氧诱导的停跳供心的使用价值?供心热缺血时限?能否采用一种整合方法(如:添加氧自由基清除剂+供心在不停跳保存+不停跳心脏移植)提高这一类供心保护效果?供心不停跳保存及不停跳移植的技术可行性?为临床利用NHBD供心进行心脏移植提供进一步的实验依据。材料和方法:雄性杂种家猪36只,体重28±3Kg,随机分为实验组和对照组(每组n=18:供/受体各6只、采血6只): (一)实验组:将依达拉奉应用于心脏移植供体中。供心经缺氧诱导停跳后继续热缺血(室温下静置)25min,随后主动脉阻断,立即用富含依达拉奉(3mg/kg)的4:1冷血心麻液经主动脉根部灌注(20ml/kg),心包腔置冰泥,切取供心,悬接在离体灌注装置(langendorff灌注装置)上进行氧合温血持续灌注,心脏复跳,离体跳动下保存2h并于再灌注初期5min再次经主动脉根部灌注依达拉奉(3mg/kg)。(二)对照组:未使用依达拉奉,余步骤与实验组相同。两组在保存结束后,取供心,均采用双腔法心脏移植,供心在不停跳下完成心脏植入。在不同时点监测心脏血流动力学指标,测定心肌酶;实验结束后取心肌组织,测定心肌含水量,及光镜与电镜观察。结果:两组动物均成功脱机。(1)心脏血流动力学:供心缺氧前,两组心脏血流动力学各项指标无显著性差异;心脏吻合结束后、主动脉开放后60min、120min,两组LVEDP、LVDPD、±dp/dt比较有显著性差异(p<0.05),实验组心功能恢复优于对照组;(2)心肌酶:心脏吻合结束、主动脉开放后120min,两组均明显上升,组间比较无显著性差异(p>0.05);(3)心肌组织含水量:对照组心肌含水量(80.91%±0.47%)高于实验组(77.68%±0.49%),两组比较有显著性差异(p<0.05);(4)光镜观察,两组无明显差异,心肌细胞结构均无明显破坏;电镜观察:对照组线粒体肿胀,嵴断裂,内质网膨胀,糖原颗粒减少;实验组细胞线粒体嵴无断裂,内质网等均清晰可见,有较多糖原颗粒,细胞器保存完好。结论:缺氧诱导的无停跳供体心,停跳后热缺血(室温下静止)25min,仍可用于心脏移植;离体心脏氧合温血持续灌注供心不停跳保存,及不停跳心脏移植,方法学上完全可行;氧自由基清除剂依达拉奉联合氧合温血持续灌注供心不停跳保存、不停跳心脏移植这一整合策略,总体上对缺氧诱导的无心跳供体心可以提供良好的心肌保护作用。
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