【摘 要】
：
第一部分下丘脑POMC神经元特异性敲除BCL6对外周代谢平衡的影响目的:构建下丘脑POMC神经元上BCL6特异性敲除小鼠,来探索BCL6在POMC神经元调控小鼠外周糖脂代谢和能量代谢的作用及机制。方法:选择8周龄的BCL6flox/flox小鼠和POMCBcl6KO小鼠,随机分为4组,进行普通饲料喂养（ND）和高脂饲料喂养（HFD）12周。在造模过程中检测各组小鼠的摄食、体重、肛温的变化,并测定呼
论文部分内容阅读
第一部分下丘脑POMC神经元特异性敲除BCL6对外周代谢平衡的影响目的:构建下丘脑POMC神经元上BCL6特异性敲除小鼠,来探索BCL6在POMC神经元调控小鼠外周糖脂代谢和能量代谢的作用及机制。方法:选择8周龄的BCL6flox/flox小鼠和POMCBcl6KO小鼠,随机分为4组,进行普通饲料喂养（ND）和高脂饲料喂养（HFD）12周。在造模过程中检测各组小鼠的摄食、体重、肛温的变化,并测定呼吸商和耗氧量等指标。通过测定空腹血糖和随机血糖比较各组小鼠血糖的变化。利用葡萄糖耐量试验（GTT）和胰岛素耐量试验（ITT）检测小鼠胰岛素敏感性的变化以及胰岛素抵抗程度。造模结束取小鼠肝脏组织做苏木素-伊红染色（HE染色）和油红O染色,观察小鼠肝脏脂肪变性和脂质沉积的程度,并测定肝脏甘油三酯含量。取白色脂肪组织做HE染色,观察小鼠脂肪组织形态的变化。取棕色脂肪组织做HE染色观察形态,免疫组化染色和WB对UCP1含量进行检测。免疫荧光染色观察下丘脑p-STAT3和POMC的表达。结果:在普食喂养的条件下,POMC神经元上敲除BCL6对小鼠的体重、摄食、肛温、耗氧量和呼吸商、血糖、胰岛素敏感性等代谢指标均没有显著影响,对肝脏脂质沉积和甘油三酯含量,白色脂肪形态,棕色脂肪形态和UCP1含量也无显著影响。在高脂饮食下,与对照组小鼠相比,POMCBcl6KO小鼠体重、摄食减少;肛温升高;空腹血糖和随机血糖降低;GTT和ITT曲线下面积减小;耗氧量增多,呼吸商升高;肝脏脂滴减少,肝脂肪变性减轻,甘油三酯含量降低;白色脂肪组织细胞体积减小;棕色脂肪组织空泡化减少,UCP1含量增多。脑组织切片免疫荧光染色结果显示下丘脑ARC区p-STAT3和POMC的表达增多。结论:POMC神经元上BCL6敲除后,可以抵抗高脂饮食诱导的肥胖,改善胰岛素抵抗,增加外周能量消耗,其机制可能是BCL6敲除后增强了STAT3-POMC信号。第二部分下丘脑BCL6调控外周代谢和能量平衡的机制验证目的:在下丘脑POMC神经元上敲除STAT3,同时在POMC神经元上抑制BCL6的表达,来验证中枢BCL6是否通过STAT3-POMC信号对外周糖脂代谢和能量平衡进行调控。方法:将8周龄的POMC-Cre小鼠和POMCStat3KO小鼠分别随机分为两组,于ARC核团定点注射腺相关病毒AAV-DIO-GFP和AAV-DIOsh BCL6,并给予高脂喂养12周。在造模过程中检测各组小鼠的摄食、体重、肛温的变化。通过测定空腹血糖和随机血糖比较各组小鼠血糖的变化。利用GTT和ITT检测小鼠胰岛素敏感性的变化以及胰岛素抵抗程度。造模结束取小鼠肝脏组织做HE染色和油红O染色,观察小鼠肝脏脂肪变性和脂质沉积的程度,并测定肝脏甘油三酯含量。取白色脂肪组织做HE染色,观察小鼠脂肪组织形态的变化。取棕色脂肪组织做HE染色观察形态,免疫组化染色和WB对UCP1含量进行检测。结果:与对照组（POMC-Cre-GFP）相比,POMC神经元上BCL6的表达被抑制后（POMC-Cre-sh BCL6）,小鼠的体重和摄食明显减少,肛温升高;空腹血糖和随机血糖降低;GTT和ITT曲线下面积减小;肝脏脂滴减少,肝脂肪变性减轻,甘油三酯含量降低;白色脂肪组织细胞体积减小;棕色脂肪组织空泡化减少,UCP1含量增多。但是在POMCStat3KO小鼠的POMC神经元上抑制BCL6的表达后（POMCStat3KO-sh BCL6）,与对照组（POMCStat3KO-GFP）相比,小鼠的体重、摄食、肛温、空腹血糖和随机血糖都没有明显的差异;小鼠的胰岛素敏感性,肝脏脂肪沉积,脂肪细胞体积和棕色脂肪UCP1的表达也都没有显著性差异。结论:POMC神经元上STAT3敲除后抵消了中枢BCL6的抗肥胖作用,中枢BCL6通过POMC神经元对外周糖脂代谢和能量平衡的调控需要STAT3的介导。
其他文献
目的:探讨白藜芦醇（Resveratrol,RES）对钙盐诱导的猪瓣膜间质细胞（porcine valve interstitial cells,p VICs）成骨样分化的作用和机制,为钙化性主动脉瓣膜疾病（Calcific aortic valve disease,CAVD）的临床药物治疗和预防提供理论依据。方法:通过免疫组织化学染色检测正常人和CAVD患者主动脉瓣膜组织中成骨标志物Runt相关
目的:探讨鼻腔钮扣式电池异物对鼻腔黏膜的损害及其治疗方法。方法:总结13例钮扣式电池鼻腔异物患者的资料,所有患者取出异物后均在鼻内镜下行鼻腔仔细清理及冲洗,受损黏膜表面覆帖涂有红霉素眼膏的明胶海绵。结果:13例患者中,10例术后恢复良好,未见明显并发症;2例患者出现鼻腔粘连;1例患者术后发生鼻中隔穿孔。结论:一旦发现异物为钮扣电池应尽快取出,术中仔细清理术腔,术后系统用药,最大程度避免鼻出血、鼻中
目的:本研究利用CBCT评估青少年双颌前突患者拔除第一前磨牙内收前牙后上下颌前牙区牙槽骨的改建情况,尤其是保持阶段的牙槽骨修复情况,以了解青少年正畸患者的骨改建的能力,为临床上青少年双颌前突患者矫治方案的设计提供一定的科学依据与临床参考。材料和方法:从重庆医科大学附属口腔医院正畸科治疗结束十八个月以上且有定期随访资料的双颌前突青少年患者中,筛选出34例符合纳入标准的患者,收集其正畸治疗前（T1期）
目的:慢性髓细胞白血病（Chronic Myeloid Leukemia,CML）是由造血干细胞异常增殖分化以及肿瘤性转化所引起的。t（9;22）（q34;q11）易位后所编码的BCR/ABL蛋白是其发生发展的标志性蛋白。针对BCR/ABL激酶区设计的一线药物伊马替尼（Imatinib,IM）取得了良好的效果,但其耐药或不耐受使得部分CML患者无法完全治愈。课题组前期发现在耐药的细胞中BCR/AB
肾脏发育过程中发挥重要作用的转录因子SIX2在肾癌中被异常激活对于肾癌的发生发展具有重要的作用。在肾癌中,SIX2表达量的异常升高能够通过增强肾癌细胞的迁移和侵袭能力来促进肾癌的转移。然而,目前对于SIX2的上游调控及核定位机制仍不明确。在本次研究中,我们首先通过生信分析发现SIX2在肾癌发挥重要作用。随后在多个病人肾癌样本和细胞样本中发现SIX2的核内定位增加。通过分析预测SIX2的核定位信号进
MicroRNA（miRNA）是生物体内具有调控功能的一类非编码RNA,长度为18～24 nt,其异常表达与肿瘤的发生发展息息相关,因而可以作为疾病诊断和预后判断的生物标志物。然而,目前miRNA的分析方法主要依赖于逆转录实时定量聚合酶链式反应（Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR）,存在费时、假阳性、样本易丢失等缺点。为了克
DNA链置换反应在DNA纳米技术中扮演着重要的角色,其在生物传感领域亦有许多应用。在此,本文针对DNA链置换的新机制及其在突变检测中的应用进行了如下研究:首先,本文介绍了一种新型的DNA链置换调节机制——合作分支迁移（Cooperative branch migration,CBM）。CBM通过调节分支迁移域的互补性来控制DNA链置换反应,其与大多数调控工具兼容并可连续微调跨越5个数量级的反应速率
背景:固相萃取（solid phase extraction,SPE）-高效液相色谱-电化学或质谱法检测血浆或24 h尿甲氧基去甲肾上腺素（Normetanephrine,NMN）、甲氧基肾上腺素（Metanephrine,MN）是临床常用的嗜铬细胞瘤（Pheochromocytomas and Paragangliomas,PPGLs）诊断方法。但固相萃取操作繁琐,处理时间长,并且血浆和24 h
临床检测RNA病毒和疾病相关RNA往往需要扩增靶标,方法耗时长,操作繁琐,假阳性率高。为了快速简单检测RNA,适应即时检测需求,利用Cas13a识别靶RNA的高特异性和高效率反式剪切酶活性信号放大作用,我们提出了一种通过Cas13a酶内链置换介导的级联循环反应快速检测RNA的策略,不需要目标扩增,实现RNA的简便快速测定。本研究首次证明了CrRNA/Cas13a复合物酶内链置换的可行性。通过设计和
目的 基于文献回顾探讨纽扣电池致儿童鼻腔损害的临床特点和诊治方法。方法 通过中国知网（CNKI）系列数据库、万方数据知识服务平台及维普期刊资源整合系统检索2002年6月至2020年12月发表的与儿童鼻腔纽扣电池异物相关的文献。研究内容包括病例地区分布、病例总数、患儿性别、年龄、纽扣电池位置、存留时间、临床表现、诊断和治疗方法。结果 共检索到45篇相关文献，纳入有效文献23篇，统计了来自15个省的3