奶牛乳房炎MTT检测方法的建立和药敏试验研究

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奶牛乳房炎是威胁乳牛业发展的主要疾病之一,也是一种严重的人畜共患病。奶牛临床型乳房炎的发病率为2%~3%,占奶牛总发病率的20%~25%,隐性乳房炎的发病率为38%~62%。据美国统计仅此一项,每年损失约13亿美元。在我国,由于分散养殖、管理条件差、检测手段不完善等原因,乳房炎的发病率很高。因此,检测乳房炎乳对保障消费者的健康及保证生产厂家产品的质量十分必要。常用的乳房炎检测方法有显微镜计数法、CMT法和LMT法等。目前,报道的乳房炎病原菌较多,主要是细菌性感染,链球菌和金色葡萄球菌具有全球广泛性,本试验依据MTT法原理,建立MTT检测乳房炎的方法,并将其应用于药敏试验研究。试验结果如下:1.为建立奶牛乳房炎MTT检测方法,探讨奶样稀释度、油脂、终止液和奶样不同培养时间对颜色深浅的影响,确立了最佳的检测条件:奶样不用取除油脂,直接做2倍稀释,终止液为SDS-DMF,奶样的最佳培养时间为8 h。2.进行了所建立的方法与细菌计数法、LMT法的比较。结果表明,该法与上述两种方法相比较,他们的一致性较好。该法与细菌计数法相比,具有以下特点:①特异性强;②快速准确;③灵敏度高;④重复性好。与LMT法比较,可用于乳房炎的早期检测。通过此试验,可以检测出奶样的最小菌数为800 cfu/mL,而低于95 cfu/mL则不能检出。通过对西北农林科技大学畜牧教学基地牛场乳房炎的调查,MTT法检测乳房炎的阳性率为40.91%,LMT法的阳性率为32.95%,MTT法检测的阳性率明显高于LMT的。在88份奶样中, 25份奶样的MTT法与LMT法的检测结果是不一致的,其中17份奶样的MTT法检测结果为阳性,而LMT法的结果为阴性;8份奶样的MTT法检测结果为阴性,而LMT法的结果为阳性。MTT法检测奶牛的左侧乳区和右侧乳区乳房炎的阳性率分别为21.59%、19.31%,LMT法检测的左侧乳区和右侧乳区乳房炎的阳性率分别为18.18%、14.77%。从两种方法的结果可知,左侧乳区乳房炎的阳性率高于右侧的;MTT法检测的前乳区和后乳区的阳性率分别为14.77%、26.14%,LMT法检测的前乳区
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