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本研究利用cDNA-AFLP方法分离了6个草菇菌丝低温诱导表达基因:VA、VC、VD、VE、VF、VH。DNA序列测定结果表明,VA为359bp,VC为2246p,VD为360bp,VE为173bp,VF为550bp(未测完全长),VH为176bp。BLASTn搜索结果表明,VD与Serpula himantioides的28S rDNA高度同源,其同源性达96%,其它序列VA、VC、、VE、VF、VH在GenBank中未找到与之同源的基因。BLASTx搜索结果表明,VA部分序列编码的蛋白和Aspergillus fumigatus中的α-1,3-葡聚糖合成酶同源性达55%,VD片段的27bp-359bp之间的序列编码蛋白和Pisum sativum中的衰老相关蛋白同源性达59%,片段36bp-179bp之间序列编码的蛋白和Branchiostoma californiense的前蛋白转换酶aPC6C同工酶的同源性达68%;VE和Danio rerio中的糖原合成激酶3-α同源性达62%,与Arabidopsis thaliana中的丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶同源性达58%;片段VF序列399bp-548bp之间编码的蛋白和Erwinia amylovora中的一种推测蛋白同源性达100%,与质粒ColE1的ORF同源性达88%;片段VC、VH未找到与之同源的蛋白质序列。 以草菇基因组DNA为模板,设计了两对引物gpdR1、gpdF1,利用PCR技术克隆了草菇的一段启动子片段。DNA序列测定结果表明,该片段长1367bp,DNA序列比对结果显示,在GenBank中不存在与之同源性较高的序列。采用Promoter Scan和PlantCARE软件对克隆的草菇启动子片段进行分析,结果表明此序列的正负链各有一启动子区,含有TATA-box,CAAT-box,G-box,GC-motif,Spl-box,CT rich-motif等顺式作用元件。采用Tfsitescan service软件分析克隆的草菇启动子片段,结果表明,该片段含有多个转录因子如GCR1,GCN4,AFT1,nit2,GF1等的结合位点。